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目的:使用流式细胞仪研究乳腺癌前哨淋巴结(SLN)发生癌转移和未发生癌转移时的免疫功能,同时对照研究乳腺癌非前哨淋巴结(NSLN)发生癌转移和未发生癌转移时的免疫功能,并相互比较。方法:30例乳腺占位患者,术前B超引导下核心针穿刺活检,病理报告均为浸润性导管癌。采用核素和美蓝双定位法定位SLN,根据病人具体情况作乳腺癌保乳手术或改良根治术,常规作腋窝淋巴结清扫。术中每位患者均只取一枚SLN和一枚NSLN进行研究。每一枚淋巴结标本中,50%标本送病理科做常规病理检查,50%新鲜标本制备成单细胞混悬液后经流式细胞仪分析其免疫功能。同时采用CD45/SSC设门三色标记流式细胞术和FSC/SSC设门单标记流式细胞术两种方法进行检测,并比较两者差异,最后选择较优的CD45/SSC设门三色标记流式细胞术检测所有淋巴结标本。所有数据用SPSS10.0软件包进行分析。结果:30例病人前哨淋巴结均成功定位,成功率100%。30枚SLN中,常规病理检测发现有癌转移的16枚。30枚NSLN中,常规病理检测发现有癌转移的13枚。每一例新鲜标本均成功制备成浓度为4-6*10~6/L的单细胞悬液,加入试剂后,使用流式细胞仪进行分析。结果发现,CD45/SSC设门法测得门内淋巴细胞数占标本中总淋巴细胞数的百分比为97.66%,FSC/SSC设门法测得门内淋巴细胞数占标本中总淋巴细胞数的百分比为79.42%,两者差异有统计学意义(P<0.05)。CD45/SSC设门法优于FSC/SSC设门法。最后采用CD45/SSC设门法检测所有淋巴结标本。SLN未发生癌转移时,CD3~+T、CD4~+T、CD8~+T、CD19~+B和CD16~+NK分别为64.97±11.18、50.39±13.27、12.88±12.16、29.08±10.35和1.09±0.88。NSLN未发生癌转移时,CD3~+T、CD4~+T、CD8~+T、CD19~+B和CD16~+NK分别为63.89±11.11、