【摘 要】
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马铃薯、番茄和茄子均为茄科植物蔬菜,是我国重要的经济作物。早疫病是其生产中的重要病害之一,主要为害叶片,还可感染茎秆、果实和薯块,可造成严重的减产。研究表明,引起茄科植物早疫病的病原为茄链格孢Alternaria solani,属于链格孢菌大孢子种（大孢子型链格孢菌）。在上述三种茄科蔬菜上已报道的链格孢菌大孢子种共8个（A.alternariacida、A.blumeae、A.grandis、A.
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马铃薯、番茄和茄子均为茄科植物蔬菜,是我国重要的经济作物。早疫病是其生产中的重要病害之一,主要为害叶片,还可感染茎秆、果实和薯块,可造成严重的减产。研究表明,引起茄科植物早疫病的病原为茄链格孢Alternaria solani,属于链格孢菌大孢子种（大孢子型链格孢菌）。在上述三种茄科蔬菜上已报道的链格孢菌大孢子种共8个（A.alternariacida、A.blumeae、A.grandis、A.linariae（A.tomatophila）、A.protenta、A.guianica、A.solani和A.tomato）,而中国目前报道了3个种（A.solani、A.blumeae和A.tomato）。我国幅员辽阔,这三种茄科蔬菜种植广泛,地理环境多样,其大孢子种病原种类多样性研究有待进一步开展。此外,A.solani种内具有高度的遗传多样性,存在准性生殖。本团队前期研究发现部分菌株的RPB2等基因片段在测序时常出现套峰现象,该现象是否与异核现象或准性生殖有关,有待进一步验证。本研究从全国广泛地收集和采集三种茄科蔬菜病害样本,对单孢分离获得的链格孢菌大孢子种进行形态学和分子系统学分类研究,明确其种类,评估其对三种寄主的致病性差异;此外,通过DAPI染色观察套峰菌株的菌丝和分生孢子,发现存在菌丝融合和细胞多核现象,再利用单孢分离幼嫩孢子和菌丝原生质体制备的方法获得原始套峰菌株的分离菌株,并检测其RPB2和Cyt b基因序列,研究套峰现象与异核现象的关系。主要的研究结果如下:1.从青海、四川、湖北和贵州四个省份,以及内蒙古和广西两个自治区的三种茄科蔬菜病样中分离获得链格孢菌大孢子种的菌株67个。根据其采集地点、寄主以及菌落形态,筛选15株进行系统分类研究,结合分子系统发育分析和形态学,结果表明共包含6个种类（属于Porri组群）,包括已知种2个A.solani和A.blumeae,中国新记录种2个A.argyroxiphii和A.linariae,新种2个。2.上述六个种类对三种茄科蔬菜致病性试验结果表明:6个种类均可侵染三种蔬菜,但致病力存在差异性。其中A.solani、A.argyroxiphii和Alternaria sp.1对三种蔬菜均有较强的致病力;A.linariae和Alternaria sp.2两种对番茄和茄子的致病力更强;A.blumeae对三种蔬菜均较弱。此外在A.linariae、A.argyroxiphii和A.blumeae中无色素分泌的菌株,对三种蔬菜的致病力显著减弱或丧失。3.对A.solani套峰菌株的菌丝和分生孢子进行DAPI染色观察时,发现菌丝细胞、分生孢子梗和分生孢子喙中存在多个细胞核,菌丝间存在大量的菌丝融合,且分生孢子萌发时不同孢子的菌丝间也存在菌丝融合,结果表明A.solani通过菌丝融合产生异核体。4.将A.solani套峰菌株YZU 171803作为母体菌株,对其进行幼嫩单孢的再分离和菌丝制备原生质体的再培养,结果表明获得菌株的菌落形态可分为3种类型。其中菌株YZU 8033的细胞核单拷贝RPB2基因套峰现象消失,而其线粒体Cyt b基因存在套峰现象,且与母体菌株套峰位点一致。该结果表明菌株YZU 171803是异核体,套峰与异核现象具有相关性。此外,上述菌株在茄子叶片的致病力试验中,与母体菌株相比YZU 8033表现出较强的致病力。由此可见,致病力与异核现象的关系有待进一步研究。
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