冻干精子生产ICSI小鼠和不同品系小鼠克隆胚胎体外发育比较

来源 :中国农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:seanstarseanstar
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本论文主要包括以下两部分研究内容:1.前期研究中,我们采用小鼠卵母细胞胞浆内精子注射(ICSI)技术,成功地用新鲜精子获得了生理健康的ICSI小鼠。在此基础上,本文结合细胞冻干技术,进行了冻干精子ICSI生产试管小鼠的尝试。B6D2F1成年公鼠的精子在Tris-HCl-EDTA(pH8.2)溶液中冻干4h后解冻,将其精子头注入到KM小鼠成熟卵母细胞的胞质中。6h后,83.0%的卵子受精。用CZB溶液体外培养发现,冻干精子生产的胚胎,体外发育至2-C(92.0%vs99.2%)、4-C(52.7%vs96.6%)、桑椹胚(36.6%vs90.8%)和囊胚的比例(21.4%vs68.1%)极显著地(p<0.01)低于新鲜精子生产的ICSI胚胎。移植2-C期冻干精子ICSI胚胎检测体内发育,结果发现,D10的着床率为63.0%(17/27);胎鼠的出生比例为21.7%(13/60),这些ICSI小鼠成年后的生理和生殖能力正常。试验中首次发现,冻干时间影响ICSI胚胎的发育,冻干4h和冻干8h的精子生产的ICSI胚胎囊胚率分别是20.9%和10.0%。试验结果说明,精子冻干后,仍能生产ICSI动物,冻干技术可以用于哺乳动物精子的保存。 2.本研究首先将常规的小鼠体细胞核移植的方法进行了部分的改动,在此基础上使卵母细胞操作后的活率有了极大的提高。之后比较了两种品系小鼠核移植后的胚胎体外发育。结果发现B6D2F1和KM小鼠的克隆胚胎形成原核的比例(91.2%vs93.5%)和卵裂(91.2%vs90.4%)的比例没有显著的差异(p>0.05),与孤雌激活组比较也没有显著的差异(p>0.05)。B6D2F1小鼠克隆胚胎体外发育至4-C(54.9%vs31.3%)、桑椹胚(36.3%vs16.5%)和囊胚的比例(27.5%vs9.6%)极显著地(p<0.01)高于KM小鼠克隆胚胎相应阶段的发育率,两种品系小鼠的克隆胚胎在4-C、桑椹胚和囊胚期都极显著(p<0.01)地低于孤雌激活组。初步结果证明杂交品系小鼠的核移植胚胎比KM小鼠的核移植胚胎有更高的体外发育比例。
其他文献
本文研究了黄连提取物和黄连素对乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-435S生长增殖的抑制及其对细胞内氧化还原平衡的影响。 方法:MTT法检测药物(黄连提取物、黄连素)和抗氧化剂(NAC
本文通过对荣华二采区10
期刊
在任务型教学模式下,小组合作学习受到广大教师的关注。课堂上,教师应根据不同的课型组织学生开展不同形式的合作学习活动,同时,也应该注重培养学生的合作学习能力,这样才能达到教
长期在白蚁防治和预防中使用的氯丹、灭蚁灵等常规化学药剂,基本上都是化学结构十分稳定,在环境中难以降解的化学药物。大量的证据证明这些药物对人类的生存环境及对水资源污染
随着多媒体技术和计算机网络技术的发展,数字视频的存储和传输不再是一件困难的事情。数字视频越来越广泛地存在于人们的生活空间中,视频点播(VOD)、数字图书馆等视频服务也开
加拿大一枝黄花(Solidago canadensis L.)是我国危害严重的外来入侵性杂草。种子具备数量多、结实率高、环境适应能力强以及长距离风传扩散等特性,这些是种群迅速扩张的主要
树突状细胞(DC)是人体内功能最强的抗原递呈细胞,以DC为基础的抗肿瘤疫苗具有良好的应用前景。DC疫苗制备的关键是使用何种方式提供肿瘤抗原以及如何使DC成为具有活化功能的成
化学是自然科学的一种,在分子、原子层次上研究物质的组成、性质、结构与变化规律;创造新物质的科学。但往往高中的孩子学化学会觉得很枯燥,但也正是因为有了化学,人类的明天才会
近年来,随着经济社会的快速发展以及科学技术的日益提升,极大地促进了现代农业生产的发展与进步.然而,一些农民受传统观念的影响,发展理念与方式还是停留在过去传统农业层面,
本文研究了20株相思根瘤菌株对5种常见抗生素的抗性,并对它们的质粒分布进行了研究。在此基础上,运用接合转移的方法把质粒pMC73A从供体菌催娩克斯菌NG13引入受体菌相思根瘤菌M