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背景:上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)、硫酸软骨素蛋白聚糖4(chondrioditin ulfatepro-teoglycans 4,CSPG4),在恶性肿瘤及系统性疾病各领域研究中均有发现且发挥这相应的作用,但在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cells carcinoma,OSCC)中的研究探索相对较少,本实验拟检测EMT相关转录因子SNAIL和TWIST 1及CSPG4在OSCC组织及OSCC癌旁组织的蛋白和mRNA水平,推测EMT相关转录因子SNAIL、TWIST 1以及CSPG4与OSCC的关系,为后期研究CSPG4在OSCC中的具体机制提供理论依据。目的:通过免疫组织化学及RTPCR检测CSPG4、SNAIL、TWIST 1在OSCC组织中的表达,探讨CSPG4、SNAIL、TWIST 1与OSCC的关系,为早期诊断、预防等方面提供理论依据。方法:(1)提取OSCC患者癌组织、癌旁组织中的CSPG4、SNAIL、TWIST 1的RNA,采用实时荧光定量PCR验证mRNA在上述各项中的表达水平,进一步解析CSPG4、SNAIL、TWIST 1在OSCC中的作用机制。(2)采用免疫组织化学技术,检测在OSCC患者的癌组织和癌旁组织中CSPG4、SNAIL、TWIST 1蛋白表达。结果:(1)、CSPG4在OSCC癌组织中大量表达,染色评分较癌旁组织升高(P<0.001),在癌组织中,CSPG4蛋白主要表达于癌细胞胞质及胞膜广泛表达,胞膜深染,角化珠不着色,癌旁正常组织CSPG4蛋白于癌旁正常上皮中少量表达。结合病例资料CSPG4的蛋白表达与患者年龄、民族、T分期及OSCC分化程度无关(P>0.05),与性别、淋巴结转移及临床分期相关,男性OSCC患者的SCPG4蛋白表达水平比女性高(P<0.05),OSCC伴淋巴结转移组较非转移组高(P<0.01),临床分期III-IV期较I-II期高(P<0.05),在男性患者组、转移组及III-IV期组阳性率较高,染色强度强,女性患者组、非转移组及I-II期组阳性率较低,染色强度较弱。CSPG4 mRNA的表达与患者年龄、民族、T分期及OSCC分化程度无关(P>0.05),与性别、淋巴结转移及临床分期相关,男性患者中表达比女性高(P<0.05),转移组较非转移组高(P<0.05),临床分期III-IV期较I-II期高(P<0.05)。(2)、Snail蛋白在OSCC组织中主要表达于癌巢组织,癌细胞胞质及胞膜,胞膜深染,角化珠不着色,在癌旁正常组织中,Snail蛋白主要表达于正常上皮基底层,往浅层方向角化层方向变浅。OSCC组织的Snail蛋白染色评分较癌旁正常组织高(P<0.01)。结合临床病例信息,Snail蛋白的表达与患者性别、年龄、民族、T分期及OSCC分化程度无关(P>0.05),与淋巴结转移及吸烟、饮酒情况相关(P<0.05),应用实时荧光定量PCR法(qPCR)检测Snail mRNA在转录组水平上的表达,Snail mRNA在OSCC组织中的相对表达量较癌旁组织高。SNAIL mRNA的表达与患者年龄、民族、T分期及OSCC分化程度无关(P>0.05),与淋巴结转移、吸烟、饮酒相关,转移组较非转移组升高(P<0.05)。其中口腔鳞状细胞癌淋巴结转移组较无淋巴结转移组高,吸烟组表达量较不吸烟组高(0.693-4.901),饮酒组表达量较不饮酒组表达量高,其余各组间未见明显统计学差异。(3)、TIWST1蛋白在OSCC组织中主要表达于癌巢组织,胞膜深染,中央角化珠不着色,在癌旁正常组织中,主要表达于正常上皮基底层,往角化层方向逐渐变浅,总体染色较浅,OSCC组织的染色评分较癌旁正常组织高。结合临床病例信息,TIWST1蛋白的表达与患者民族、饮酒、性别、T分期、年龄及OSCC分化程度无关(P>0.05),与淋巴结转移及吸烟情况相关(P<0.05),实时荧光定量PCR法(qPCR)检测TWIST 1 mRNA在转录组水平上的表达,结合临床病例信息,TWIST 1 mRNA的表达与患者民族、饮酒、性别、T分期、年龄及OSCC分化程度无关(P>0.05),与淋巴结转移及吸烟情况相关(P<0.05),OSCC癌组织中的表达量较癌旁组织高。结论:(1)、CSPG4在OSCC中的大量表达,表明CSPG4与OSCC之间存在正性调控作用,为OSCC早期诊断、预后等提供了可能,甚至在OSCC的治疗中提供了一个靶向治疗策略。(2)、EMT相关因子SNAIL及TWIST 1在OSCC中高表达,提示EMT与OSCC之间的关系十分密切。(3)、SNAIL及TWIST 1均与OSCC淋巴结转移相关,提示SNAIL及TWIST1甚至是EMT对于OSCC的淋巴结转移起促进的正性调控作用。(4)SNAIL及TWIST 1均与OSCC患者吸烟习惯相关,提示吸烟可能成为EMT的诱因之一。(5)CSPG4作为EMT的上游调控蛋白之一,有可能成为抑制EMT及OSCC发展的重要因素。