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目的分析肝细胞癌中miR-10b、RHOC及相关基因的表达,探讨这些基因参与肝细胞癌恶性生物学行为,及miR-10b可能参与调控RHOC转移浸润的机制。材料和方法选取2000年1月至2005年12月在我院行手术切除的肝细胞癌病例,共375例,获得随访信息185例。分析本组病例临床病理特征及与预后的关系。留取2007～2008年间手术切除的新鲜肝细胞癌及癌旁肝组织标本19例,western blot检测RHOC蛋白的表达,免疫组化检测cyclin D1、P21WAF1的表达,分析其相关性及与临床病理特征的关系;选取有随访资料的病例80例,免疫组化检测cyclin D1、P21WAF1、p53、ki-67及GPC3在肝细胞癌中的表达,分析各基因表达与临床病理特征的关系及各基因表达之间的相关性;Kaplan-Meier生存分析分析各基因表达的预后意义;COX风险模型分析各临床病理特征及基因表达的预后意义。提取新鲜肝细胞癌及癌旁肝组织中的RNA,实时定量PCR法检测miR-10b和RHOC mRNA基因的表达,分析二者相关性及与临床病理特征的关系。结果1.本组资料显示肝细胞癌发病年龄19～72岁,平均50.57±10.46岁,发病高峰年龄40～60岁,男女比例为10.7:1;HBsAg（+）87.4%,anti-HCV抗体（+）4.3%;术后3年生存率为52%,5年生存率为38%;肿瘤数目（p=0.000）、肿瘤大小（p=0.025）、组织学结构类型（p=0.000）、核分级（p=0.000）、分化程度（p=0.001）及血管浸润均（p=0.000）与预后明显相关;其中组织学结构类型中细梁状型生存时间与致密梁状型和腺样型无明显区别（p＞0.05）而明显高于粗梁状型、实性型和硬化型（p≤0.009）,硬化型生存时间与实性型之间无明显区（p＞0.05）而明显低于其余各型（p≤0.006）;核分级1级与2级生存时间无明显区别（p＞0.05）,核分级3级与4级生存时间无明显区别（p＞0.05）,而核分级3级生存时间明显低于2（p=0.000）;小细胞型、巨细胞型和梭形细胞型主要由实性型和粗梁状型组织学结构类型构成,明显不同于透明细胞型（主要由细梁状型和粗梁状型构成）（p≤1.006）。2.Western blot显示9/19例肝细胞癌中RHOC蛋白高表达,与血管浸润明显相关（p=0.020）。RHOC阳性表达与cyclin D1阳性表达明显正相关（P=0.010）;cyclin D1阳性表达与高核分级明显相关（p=0.041）;p21WAF1及p53阳性表达均与分化程度（分别为p=0.032,p=0.031）和血管浸润（p=0.036,p=0.011）正相关;ki67阳性表达与分化程度（p=0.004）、核分级（p=0.045）和血管浸润（p=0.001）正相关;GPC3表达与肿瘤数目（p=0.038）和分化程度（p=0.013）正相关。生存分析显示cyclin D1及ki67有明显预后意义。ki67阳性表达与p53（p=0.000）及p21WAF1（p=0.047）阳性表达有明显相关性,其他各基因之间表达无明显关系。3.COX回归模型分析显示肿瘤大小（p=0.042）、肿瘤数目（p=0.004）及血管浸润（p=0.000）为独立预后因素。4.与癌旁肝组织相比,miR-10b在肝细胞癌中的平均表达增高（p=0.049）,但miR-10b低表达组血管浸润明显高于高表达组（P=0.020）;与癌旁肝组织相比,RHOC mRNA在癌组织中的表达增高（P=0.032）,同时RHOCmRNA高表达组血管浸润明显高于低表达组（P=0.041）。miR-10b和RHOC mRNA的表达未发现有明显相关性。结论1.除肿瘤大小、肿瘤数量、分化程度、血管浸润以外,肝细胞癌组织学结构类型和核分级均有明显预后意义。2.miR-10b、RHOC、cyclin D1、ki67及GPC3均参了与肝细胞癌的生物学进程;RHOC可能参与了细胞周期调控。cyclin D1及ki67有明显预后意义。GPC3可作为肿瘤标记物。miR-10b与RHOC的表达无明显相关性。3.COX回归模型分析显示肿瘤大小、肿瘤数目及血管浸润为独立预后因素。