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本文为确定我国鹿群的结核病的流行情况，应用聚合酶链反应(PCR)对采自国内某一地区鹿场屠宰点的79份鹿全血样品进行检测，结果表明鹿群的结核病阳性率为43.0％，其中还有结核分枝杆菌的感染，证明鹿群中仍然高发结核病。
为了有效预防和治疗鹿结核病，以PCR检测鹿结核病阳性分离菌株基因组DNA为模板，应用PCR方法扩增热休克蛋白65(Hsp65)基因，PCR产物经纯化与测序载体PMD18-T进行连接，转化克隆宿主菌E.coliDH5a中测序鉴定，结果碱基序列与GenBank上结核分枝杆菌HSP65碱基序列100％一致。将连接有HSP65基因的PMD18-T载体和原核表达载体pGEX-6P-1分别用EcoRI/SaLI双酶切处理，回收纯化后，连接构建重组表达载体，转化克隆宿主菌E.coliDH5a中，经酶切及PCR鉴定为阳性克隆后进一步测序鉴定，结果碱基、预测氨基酸序列均与HSP65完全一致，并具有正确的读码框，获得的重组表达质粒pGEX-HSP65可用于下步表达。
大量提取重组质粒pGEX-HSP65，将其转化到表达宿主菌E.coliBL21中，鉴定为阳性克隆后，以1mMol/L终浓度的IPTG37℃诱导表达，SDS-PAGE电泳分析，表达的蛋白条带大小约86kDa，与预期的结果相符，经薄层扫描表达外源蛋白量占全菌体蛋白总量的30.7％。HSP65基因表达的融合蛋白GST-HSP65经过Westernblot检测，在86kDa处显示了特异蛋白结合带，表达的蛋白能被PCR检测鹿结核呈阳性的血清特异地识别，具有良好的抗原性，为进一步研究其在结核病诊断和防治中的应用打下了基础。