核仁参与的有丝分裂时长监控机制研究

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细胞的有丝分裂是一受到精确调控的过程,其目的在于将复制后的染色体准确的分离到两个子细胞中。干扰有丝分裂的正常进行会导致染色体错误分离和DNA损伤的产生,从而引起细胞周期的阻滞。研究发现,短时间的延长细胞处于有丝分裂前中期的时间,不会引起染色体的错误分离和DNA的损伤,但分裂用时大于1.5小时的细胞在分裂结束后发生p53的累积,并阻滞在G1期不能继续分裂,这提示我们细胞内存在监控机制能够监测有丝分裂的时长。这里,我们研究发现核糖体合成压力参与了分裂结束后p53的稳定。首先,我们发现在延长有丝分裂时间后,分裂用时大于1.5小时的细胞在分裂结束后有强烈的p53和p38的活化。文献报道,活化的p38可以磷酸化p53的多个位点,所以我们研究了p38是否能够磷酸化p53进而促进p53的稳定,结果发现p38的激酶活性对于p53的稳定不是必需的。由于p53的稳定和其对于下游基因的转录对于细胞周期的阻滞是必需的,接下来我们关注了p53的稳定方式。P53的稳定主要受到其E3泛素连接酶HDM2的泛素化修饰和降解,而分裂期部分蛋白质会逐渐降解,如果HDM2在分裂期降解或不能正常发挥功能则可能导致p53的稳定。结果发现,p53和HDM2的蛋白水平在分裂期没有发生变化。在没有发生DNA损伤的情况下,p53还有一类稳定方式即发生核仁压力时,核糖体生成受到干扰,将会导致核糖体组分发生核仁到核质的定位变化,进而抑制Hdm2的功能从而导致p53的稳定。而在分裂期,细胞核仁解聚核仁组分定位于染色体周围,核糖体RNA不能转录,核糖体的组装也停止,这一过程是否会引起p53的稳定尚不清楚。通过敲低核糖体亚基单位RpL11后发现,分裂结束后p53的累积明显减少。这里,我们提出延长有丝分裂时间后,核糖体的组装不能够正常进行将导致p53的稳定,进一步的上游信号通路有待继续研究。
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