解淀粉芽孢杆菌BP30对梨采后灰霉病病害的生物防治研究

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解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)是一种与枯草芽孢杆菌亲缘性很高的革兰氏阳性菌,具有运动性,在生长过程中能产生一系列的抑菌代谢物并能生成芽孢。解淀粉芽孢杆菌具有来源广、抗菌谱广、安全且发酵周期短等优点,在微生物拮抗剂防治果蔬采后病害方面受到越来越多的关注。本研究通过平板对峙实验,筛选获得一株对梨釆后病原真菌灰葡萄孢具有较高拮抗性的解淀粉芽孢杆菌,研究了其对梨釆后灰霉病害的生防效果,并对其生防的机理进行了研究。主要研究结果如下:(1)通过平板对峙实验,筛选获得一株对梨釆后病原真菌灰葡萄孢具有良好拮抗作用的芽孢杆菌,通过形态观察、生理生化检测及16S rRNA序列分析,确定其为解淀粉芽孢杆菌,将其命名为:解淀粉芽孢杆菌BP30。(2)BP30能够有效控制灰霉病,当在25℃储存7天时,对照组梨果的病变率为100%,解淀粉芽孢杆菌处理的梨从低浓度组(1×106CFU/m L)至高浓度组(1×108CFU/mL)病变率逐渐降低,说明解淀粉芽孢杆菌细胞悬浮液的浓度对其防治梨灰霉病的功效有很大影响,浓度越高,病变率越低,病变直径越小。并且,在0℃储存30天的经解淀粉芽孢杆菌处理的梨病变率和病变直径,都比在25℃储存的对照组病变率和病变直径低,说明低温储藏有利于解淀粉芽孢杆菌对梨灰霉病的防治。解淀粉芽孢杆菌控制灰霉病的同时,对梨的采后质量参数包括质量损失、滴定酸度、坚硬度和总可溶物都无显著影响,并能够显著提高梨果肉的维生素C含量。(3)通过机理研究证实了解淀粉芽孢杆菌BP30不是通过分泌抑菌物质来发挥抑制致病菌作用的,营养与空间的竞争是解淀粉芽孢杆菌抑制灰葡萄孢的主要方式;解淀粉芽孢杆菌能够在梨伤口处快速的生长,并占据梨伤口表面的空间,从而发挥抑制致病菌的作用。解淀粉芽孢杆菌对灰葡萄孢孢子萌发的影响结果显示经解淀粉芽孢杆菌处理的孢子萌发率和萌发管长度显著低于对照组,说明菌株BP30能够有效抑制灰葡萄孢孢子的萌发和生长,抑制孢子的萌发也许是解淀粉芽孢杆菌防治灰霉病的其中一项机理。诱导抗病性防御机制的研究结果显示,解淀粉芽孢杆菌在抑制灰葡萄孢生长的同时,也促进了与水果自身抗病性有关的酶类:多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)分泌,说明解淀粉芽孢杆菌能够引起梨的应激反应,提高了水果对致病霉菌的抵抗能力。提高水果的自身抗病能力可能是解淀粉芽孢杆菌抑制灰葡萄孢的另外一种方式。本研究通过对解淀粉芽孢杆菌BP30对梨釆后灰霉病害的防治效果和生防机理的探究,为梨釆后病害的生物防治打下了坚实的理论基础和技术支撑。
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