研究背景及目的肿瘤转移是肿瘤病人死亡的主要原因,其发生的主要环节包括原位肿瘤细胞播散入血并播散至转移器官及定植肿瘤细胞适应转移器官微环境[1-6]。而近来的研究发现肿瘤细胞在转移至远端器官之前便能改造其微环境,使之更有利于肿瘤定植及生存,即预转移微环境（Pre-metastatic niche）[7-11]。已有文献报道预转移微环境标志物有助于肿瘤诊断及预后评估[12-15]。并且靶向预转移微环境的治疗方案已被证实是一种有前景的肿瘤转移干涉手段[16-20]。因此,寻找预转移微环境相关标志物对肿瘤诊断、预后判断和肿瘤转移的干预有重大意义。预转移微环境的主要特征包括炎症、免疫抑制、血管生成、血管通透性、淋巴管生成、器官亲嗜性和重编程[21]。其中,对微环境重编程,尤其是代谢重编程在预转移微环境形成中作用的研究尚不深入[22]。已有文献报道将小鼠乳腺持续性地暴露于草酸可以诱导乳腺癌发生,并且草酸处理可以通过上调致癌基因c-fos表达促进乳腺癌细胞增殖[23]。这些研究表明草酸是乳腺癌的促癌因素,但草酸在肿瘤预转移微环境中的作用尚未有文献报道。本研究旨在揭示草酸代谢在乳腺癌细胞诱导的肺预转移微环境形成中的作用,并探讨其作为干预乳腺癌肺转移靶点的可能性。研究方法本课题利用脂肪垫接种法构建乳腺癌肺转移模型;利用荧光定量PCR、Western blot、免疫组化检测肺组织Hao1表达;利用尾静脉注射法给予小鼠Hao1抑制剂CCPST及Hao1敲除腺相关病毒处理;利用比色法检测小鼠肺泡灌洗液草酸浓度;利用荧光定量PCR检测肺组织中乳腺癌细胞标签luciferase表达或炎性指标、促转移指标表达水平;利用气管滴注法构建小鼠肺组织草酸堆积模型;利用免疫组化检测小鼠肺组织中性粒细胞浸润情况及肺转移灶ki67及OCT4表达水平。研究结果我们成功构建了乳腺癌肺转移模型;荧光定量PCR、western blot和免疫组化结果表明,原位接种乳腺癌细胞的小鼠预转移阶段肺泡上皮细胞Hao1表达上调;CCPST及Hao1敲除腺相关病毒处理能抑制负瘤小鼠乳腺癌肺转移;负瘤小鼠预转移阶段肺泡灌洗液中草酸浓度升高;肺组织草酸堆积能促进乳腺癌细胞肺定植能力及诱导肺组织炎性指标及促转移指标表达;免疫组化结果表明CCPST处理能够抑制负瘤小鼠肺组织中性粒细胞浸润及肺转移灶ki67及OCT4表达。结论1、揭示预转移微环境形成的新机制即Hao1介导的草酸代谢在调控肺预转移微环境形成中的作用,为肿瘤如何诱导预转移微环境形成提供新的见解。2、Hao1可作为干预乳腺癌肺转移的潜在靶点。