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目的:
观察NaOH-SDS复合消蚀法制备的猪无细胞真皮基质(ADM)的成分、结构及其抗张力性能,探讨其作为腹壁疝修补材料的应用价值。
方法:
取猪全厚皮肤,适当修剪,以1mol/L NaCl水溶液37℃浸泡24h,除去表皮细胞层。先后放于0.5%SDS溶液和4%NaOH溶液中消蚀16小时,其间用B型超声波清洗仪间断震荡以除去细胞碎片,制成ADM。取ADM,常规脱水,石蜡包埋及切片,HE染色,观察ADM的一般结构和细胞成分的残留情况。利用冰冻切片机将整块消蚀好的ADM切成厚约4mm,5×5cm的真皮片,放于含有青霉素的PBS溶液中保存待用。选用重约220~250克的SD雄性大鼠45只,随机分为疝模型组7只、Marlex网(聚丙烯单丝网)组10只、ADM组28只。常规去毛消毒,在腹部切开皮肤,去除约2.5×3cm大小的腹壁肌层,筋膜及腹膜,疝模型组直接缝合皮肤;Marlex网组以Marlex网行疝修补;ADM组以ADM片修补腹壁缺损。术后观察伤口愈合情况及有无腹壁疝的发生,并ADM组术后1,2,3,5,10周分别取材,其中每周各组取4只用于HE染色,光镜观察,术后第5周Marlex网组和ADM组各取6只用于抗张力试验。比较ADM组不同时期ADM新生细胞数,新生血管的密度变化,胶原纤维变化。将 ADM 片与 Marlex网裁剪成2×4cm大小的平片,行抗张力试验;及术后第5周,ADM-筋膜组织与Marlex-筋膜组织抗张力试验,进行统计学分析。
结论:
1.NaOH-SDS复合消蚀法制备的ADM细胞成分脱除彻底,胶原纤维支架完整,可见基膜存在,而且免疫源性低,组织相容性好,易于血管化。
2.ADM有较强的抗张力性,尤其是植入体内后,经血管化,宿主细胞植入等,可以使ADM筋膜组织抗张强度稳定。
3.NaOH-SDS复合消蚀法制备的ADM适合作为腹壁疝的修补材料。