自1981年首先发现艾滋病以来，HIV病毒已造成了全球性的传播，成为威胁人类健康的主要因素之一。普遍认为研究出安全有效的HIV疫苗是抵抗艾滋病的最佳途径。目前，HIV疫苗的研制策略包括传统的减毒、灭活疫苗，以及靠现代基因工程发展起来的亚单位疫苗、DNA疫苗和重组载体疫苗等，但仍没有哪一种疫苗可有效预防HIV的感染。亚单位疫苗不含病毒核酸，具有良好的安全性，对它的研究一直受到人们的关注。以往的研究表明，基于单一基因而设计的亚单位疫苗免疫原性有限，无法完全中合HIV病毒的感染。将多个基因融合表达，得到的重组抗原具有更多的抗原决定簇，有更好的免疫原性。杆状病毒表达载体系统可以容载大片段外源基因，可使多个基因共表达，克服了由单一成分所构成的亚单位疫苗免疫原性弱的缺点。而且，杆状病毒表达载体系统具有翻译后修饰功能，表达产物天然活性好，免疫原性高，因而在疫苗研究中更具有优势。 本实验采用PCR方法从HIV-1基因组cDNA质粒pNL4-3中克隆到除外膜蛋白基因env外的所有基因片段(包括gag、vpr、pol、vpu，vif、tatl、tat2、nef,revl、rev2)，再用PCR重叠延伸剪接技术(SOEPCR)将单个基因片段相互连接，并突变rev，以外的全部基因的终止子，得到三个较大的融合片段，即gag-vpr、pol-vpu-vif-tat-nef，nef-rev。利用片段上的独特酶切位点，将三片段依次插入pBacPAK8质粒，得到重组转移载体pBacPAK76-04。在重组转移载体中，除env外的所有HIV-1基因融合成为了一个单一的、大的开放阅读框。将重组转移载体pBacPAK76-04与线性化的Bm-BacPAK6DNA共转染家蚕BmN细胞，经同源重组，含有目的基因的开放阅读框插入到多角体启动子下游，从而获得重组病毒Bm-BacPAK76-04。通过挑斑以筛选得到纯化的重组病毒后，感染家蚕BmN细胞，分别收集24h、48h、72h、96h和120h的表达产物，用HIVP24抗体进行ELISA分析，结果表明重组蛋白在细胞中有表达，且在感染后72h表达量达最高值，表达产物具有HIV-1多个蛋白的免疫原，可进一步用于}HV候选疫苗的研究。