不同寄生蜂寄生后小菜蛾精巢mRNA的表达差异

来源 :河南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:super_mouse
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本文以蔬菜重要害虫——小菜蛾Plutella xylastella(Linnaeus)及其优势种天敌菜蛾盘绒茧蜂Cotesia plutella、半闭弯尾姬蜂Diadegma semiclausum寄生体系为研究对象,利用近年发展起来的基因筛选方法,通过比较正常小菜蛾精巢与被寄生小菜蛾精巢之间基因表达的差异,分离并克隆寄生蜂抑制小菜蛾精巢的相关基因,在分子水平揭示不同体系中2种PDV对相同寄主的生理调控机制,为明确两类寄生蜂病毒(Bracovirus和Ichnovirus)在同一寄主体内表达方式和调控寄主的作用途径提供依据。 本试验以正常小菜蛾精巢和被两种不同寄生蜂寄生过的小菜蛾精巢为研究对象,提取组织总RNA,利用mRNA差异显示(differential display PCR,DDRT-PCR)的技术,以随机引物1~8与锚定引物T11M(M为A,C或G)配合,PCR扩增cDNA后,1%的琼脂糖凝胶电泳,筛选PDV特异性表达的cDNA片断。并对筛选出来的cDNA片断进行二次PCR、纯化、克隆、测序、序列分析和设计引物验证等实验研究。结果表明,经差异扩增与电泳后,可见十余条差异条带,将这些差异条带进行第二次PCR扩增,回收纯化,并与PT18-T载体进行连接,经蓝白斑筛选后进行测序,通过Gene Bank数据库进行了序列的同源性比较,发现除一条cDNA片断序列外,其余所有的序列与数据库中的序列比较,没有同源序列,而那条比对上的序列与一种植物的序列有100%的同源性,疑为被污染。根据序列的cDNA片断设计引物,以所提RNA为膜板进行PCR扩增,发现在三种精巢中均有片断被扩增出,但还未证明这些差异片断为PDV相关基因。
其他文献
目的:总结分析肺结节疾病使用多层螺旋CT胸部低剂量扫描的可行性与应用效果.方法:收集整理我院多层螺旋CT胸部扫描检查的80例患者,均收治于2013年5月—2017年8月,其中常规剂
目的:探讨预见性护理对剖宫产术后腹胀的影响.方法:以2016年1月至2017年12月在我院择期剖宫产分娩的82例产妇作为研究对象,41例实施常规护理作为对照组,41例实施预见性护理作
大豆作为世界上一种非常重要的油料作物,在农业生产和人们生活中扮演着重要的角色。而由大豆疫霉引起的大豆根腐病是一种毁灭性的病害,每年都会造成巨大的经济损失。目前尚未
小麦条锈病(由小麦条锈菌Puccinia striiformis Westend f. sp. tritici所致)是我国小麦(Triticum aestivum L.)的主要病害。国内外实践证明,利用抗病品种是防治该病的主要措施。由主效基因控制的过敏性坏死反应(HR)类型的抗病性常常被条锈菌新的毒性小种所克服,该类抗病资源不能满足生产的需求;另一类抗病资源材料表现为数量抗病性,能够在一定程度上降
目的:研究分析综合康复护理对大面积烧伤患者生活质量的影响.方法:本次研究采用回顾性分析,将2017年2月—2018年2月收治的大面积烧伤的患者60例按照数字随机法分成两组,常规
目的:分析并总结食道支架置入术后的饮食干预措施.对从2012年12月—2013年12月期间接受食管支架置入术的30例患者进行饮食干预.结果:40例患者未发生由于饮食原因所致的并发症
目的:对比分析应用丁苯酞胶囊、丁苯酞注射液对急性脑梗死患者进行治疗的临床效果.方法:随机选择本院于2016年2月—2017年3月收治的76例急性脑梗死患者分为对照组、观察组,在