葡萄糖母液色谱分离填料的合成及其分离性能研究

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采用折光仪和高效液相色谱法分析得到了葡萄糖一母液总糖含量为45 g/100ml,葡萄糖含量高达85 %。采用分散聚合方法合成了具有交联结构的苯乙烯-二乙烯苯基体树脂,然后基于此填料磺酰化得到离子交换树脂,研究了色谱分离提取结晶葡萄糖母液中葡萄糖的色谱填料。采用正交实验初步考察了不同因素对微球粒径和分离效果的影响。通过自行装分析柱考察了其色谱分离性能,最终优化得到了合成钙离子螯合树脂所需的反应条件:交联度15%,致孔剂配比3︰1,致孔剂用量50%。实验证明:自装柱性能良好,葡萄糖和二糖分离度达到1.45,适宜分离提取葡萄糖母液中的葡萄糖。采用自合成钙型螯合树脂装制备柱,对柱温、柱长径比、进料量、洗脱速度等操作因素进行了分离条件优化。在优化条件柱温:60℃;柱高:60 cm;进料量:10 mL;洗脱速度:2.0 mL/min下,对葡萄糖结晶母液进行分离,得到了纯度大于84%,收率大于95%的葡萄糖组分。采用高效液相色谱法,双柱定性(氨基键合柱和离子交换柱),外标定量分析葡萄糖二母液(SMB分离后母液)中的低聚糖组分及其含量,分析得知二母中总糖含量达4 g/100ml,其中异麦芽糖含量高达37%。应用硅胶的氨基键合改性方法,研究分离提取葡萄糖母液中低聚糖组分中的同分异构体的工业色谱填料。采用正交实验初步考察了不同因素对键合量和分离效果的影响。经红外光谱、元素分析对键合相鉴定和评价,并且考察了该键合相的pH适用范围。通过自行装分析柱考察了其色谱分离性能。优化后得到分离提取异麦芽糖的填料合成条件:γ-氨丙基三乙氧基硅烷用量为1.0倍的硅胶,溶剂甲苯用量是硅胶的10倍,反应时间为16小时。结果表明:改性后硅胶键合相具有较好的色谱性能,麦芽糖和异麦芽糖之间的分离度达到1.23,且在pH2~12之间稳定性能良好,可以有效分离低聚糖中的同分异构体。采用自合成氨基硅胶装制备柱,在一定的分离条件下对互为同分异构体的麦芽糖和异麦芽糖进行分离,能够得到纯度大于82%,收率大于97%的异麦芽糖。
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