楝科药用植物望谟崖摩(Amoora ouangliensis)的化学成分及其生物活性研究

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崖摩属为楝科楝亚科米仔兰族下一属,全世界约25种,分布于印度、马来西亚和中国。该属植物化学成包括三萜、二萜、甾体和生物碱等四种类型化合物,已报道的生物活性包括抗炎、抗肿瘤、抗菌及抗病毒等多种生理作用。望谟崖摩(Amoora ouangliensis)属崖摩属植物,《中国植物志》之前将其归为米仔兰属Aglaia lawii,后修订为Amoora ouangliensis。目前对望谟崖摩的研究报道很少,迄今仅有4篇报道其含有三萜、二萜和甾体类化学成分。鉴于此,我们对其化学成分及生物活性进行系统的研究。本论文对望谟崖摩枝叶的化学成分进行了深入研究。将晾干的望谟崖摩枝叶用95%乙醇充分提取,减压浓缩所得粗提物综合运用正相和反相硅胶柱层析、凝胶Sephadex LH-20柱层析和反相高效液相色谱(RP-HPLC)等多种现代色谱分离纯化技术分离得到42个化合物。依据核磁共振波谱(NMR)、质谱(MS)、紫外光谱(UV)、红外光谱(IR)、旋光光谱等波谱学方法以及与报道的已知化合物数据进行比较,将这42个化合物鉴定为22个甾体,包括胆甾醇(1-14)、麦角甾醇(15-19)、谷甾醇(20,21a,21b),18个三萜(22-32,33a,33b,34-38),一个二萜(39)和一个倍半萜(40)。总共分离得到15个新化合物,包括9个新甾体类化合物:ouangliensol A(1)、ouangliensols B-F(4-8)、ouangliensol G(12)、ouangliensols H-I(15-16)。6个新三萜类化合物:ouangliensins A-B(26-27)、ouangliensins C-E(33a,33b,34)、ouangliensin F(36)。分离得到的新甾体类化合物侧链均含有C-23位羰基,其中化合物6和7的C-3及C-4位邻二羟基形成了丙酮叉,有可能是实验中使用丙酮而形成的人工产物。新三萜类化合物均为A环在C-3和C-4位开环的达玛烷型三萜,其中化合物27为四降三萜,结构新颖;化合物33a,33b和34的C-5位连有环氧乙烷,在生源途径上有可能是化合物30的C-5位异丙羟基环合形成。而同分异构体化合物36,37和38的C-24及C-25位的邻二羟基也形成了丙酮叉结构,也可能为人工产物。在体外药理活性筛选过程中,我们对36个化合物(部分已知化合物和所有新化合物)进行了PTP1B抑制和抗肿瘤(肺癌细胞A-549、结肠癌细胞HT-29、肝癌细胞SNU-398和胰腺癌细胞Capan-1)活性筛选。PTP1B抑制活性筛选结果显示,13个已知化合物(9、14、17、18、22、24、25、28、29、32、35、37、38)和3个新化合物(7、27、36)显示了不同程度的抑制活性(IC50值为0.40~15.46μM),其中有11个化合物PTP1B抑制活性显著,尤其是新化合物ouangliensins B(27)、F(36)和已知化合物17、35、37和38的活性强于阳性对照齐墩果酸(IC50值为2.50μM),其IC50值分别为1.20、0.40、2.38、0.54、0.75、0.84μM。有意思的是,C-3/C-4位开环的达玛烷型三萜类化合物PTP1B抑制活性的构-效关系研究发现:C-24位有羟基取代和△4(28)双键可大幅度增强活性;OH-24与OH-25形成丙酮叉结构能使活性增强;C-3位羧基乙酯化对活性无影响而C-3位甲酯化会降低活性。抗肿瘤活性结果显示,已知化合物9和17对结肠癌细胞HT-29(IC50值分别为4.22、5.71μM)和胰腺癌细胞Capan-1(IC50值分别为9.02、9.83μM)均显示较强的生长抑制作用。此外,新化合物ouangliensol C(5)对结肠癌细胞HT-29显示显著地抑制作用,其IC50值为7.71μM。
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