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癌症已经成为21世纪影响人类健康生活的一个重要杀手。根据统计数据，全球每年有约800万人死于癌症，我国每年约有150万人死于癌症。其中，乳腺癌是女性发病率最高的癌症。同时，它也是目前研究最透彻的癌症，其传统的治疗方法有手术，放疗和化疗。但是，使用这些方法治疗过后往往会出现乳腺癌的复发，复发后乳腺癌细胞可能会产生放疗和化疗的耐受性。所以研究针对乳腺癌的新疗法迫在眉睫。而近年来兴起的靶向疗法是针对癌细胞表面或者内部一些表达异常的蛋白，通过抑制其表达或者活性，从而达到治疗乳腺癌的目的。成功的肿瘤靶向疗法需要寻找合适的治疗靶点。Bcl-2家族成员是细胞凋亡的重要调控分子。研究发现，Bcl-2家族抗凋亡成员在乳腺癌中往往异常高表达。从而使肿瘤细胞逃逸凋亡信号，最终促进了肿瘤的发生发展。本文通过使用针对Bcl-2家族抗凋亡成员的小分子抑制剂对乳腺癌细胞系进行研究，测试这些抑制剂杀伤乳腺癌细胞系的能力，并且分析了Bcl-2家族抗凋亡成员作为乳腺癌治疗靶点以及ABT-199，ABT-737，Tw-37治疗乳腺癌的潜在可能性。Bcl-2抗凋亡成员在许多乳腺癌细胞系中高表达，而目前有多种针对Bcl-2家族抗凋亡成员的抑制剂，例如：ABT-737, ABT-199，Tw-37。通过MTT实验，在7种乳腺癌细胞系中测试了这3种抑制剂和常规化疗药物阿霉素，紫杉醇的作用效果。ABT-737对HBL-100，MDA-MB-468，MCF-7，MDA-MB-231，MDA-MB-435这5个乳腺癌细胞系有较强的杀伤效果。ABT-199对HBL-100，MDA-MB-468，MCF-7，MDA-MB-435这4个乳腺癌细胞系有一定杀伤作用。Tw-37对HBL-100和MDA-MB-468有较好的杀伤效果，对MCF-7和MDA-MB-435有适度的杀伤效果。为了进一步研究Bcl-2家族抗凋亡成员抑制剂对肿瘤细胞增殖的影响，我们在MDA-MB-231和MCF-7细胞系中进行了克隆形成实验，使用的药物浓度依次是0.1μM，1μM，6μM。随着ABT-737药物浓度的增加，两种细胞系形成克隆的能力逐渐减弱，但是ABT-199和Tw-37在高浓度作用下也没有影响两种细胞系形成克隆的能力。化疗药物对这两种细胞系的作用很明显，严重影响了其克隆形成能力。这一实验结果与MTT实验相符。ABT-737对乳腺癌细胞系杀伤效果很明显，但是ABT-199并没有理想的效果，这说明在乳腺癌细胞系中,Bcl-2家族抗凋亡成员具有功能的冗余性，当Bcl-2被抑制时，乳腺癌细胞可以通过其他的Bcl-2家族抗凋亡成员来行使Bcl-2的功能。ABT-737只能抑制Bcl-2，Bcl-xl，Bcl-w，但是不能抑制Mcl-1的活性。实验数据显示，在乳腺癌细胞系中，只有当ABT-737浓度大于1μM时，其作用效果才逐渐显现，这可能就是因为这些乳腺癌细胞系中Mcl-1蛋白的弥补作用。TUNEL实验的数据证明，ABT-737确实是通过细胞凋亡途径引起了乳腺癌细胞系MDA-MB-231和MCF-7的死亡，由于ABT-737直接与Bcl-2，Bcl-xl和Bcl-w蛋白结合，所以，加入药物后2小时内，细胞快速进入凋亡状态。而ABT-199和Tw-37并没有引起MDA-MB-231和MCF-7细胞的凋亡。联合用药实验表明ABT-737在BT-549和T47D细胞系中可以增强阿霉素和紫杉醇的作用。以上实验说明Bcl-2家族抗凋亡成员是乳腺癌细胞系生存的关键蛋白，而针对Bcl-2家族抗凋亡成员的靶向抑制剂也可能成为以后治疗乳腺癌的潜在药物。