健脾化浊降脂方对肥胖小鼠代谢稳态和慢性炎症的影响及机制研究

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目的:观察健脾化浊降脂方对肥胖小鼠模型效应、脂肪因子、促炎细胞因子、血脂血糖等相关指标、病理形态学和PPARγ/SREBP-1c/TNF-α/IL-6基因mRNA、蛋白表达的变化,探讨本方对肥胖小鼠模型代谢稳态和慢性炎症的影响及其作用机制。方法:高脂饲料诱导建立肥胖小鼠模型,中药组给予健脾化浊降脂方和西药组给予奥利司他胶囊进行分组对照治疗。1.定期观察各组小鼠精神状态、活动等情况并称量记录各组小鼠体重、腹围;2.治疗结束末采用小动物活体Micro-CT成像检测脂肪分布、含量及体积变化;3.观察肝脏形态并称取肝脏和内脏脂肪、皮下脂肪湿重,计算其相应系数;4.血清中血脂谱相关指标、血糖指标使用全自动生化分析仪检测;5.脂肪因子瘦素、抵抗素、脂联素、胰岛素和促炎细胞因子IL-6、TNF-α、FFA采用酶联免疫吸附测定法测定;6.肝脏和脂肪组织的病理学形态结构使用显微镜观察;7.TNF-α/IL-6基因mRNA表达使用RT-q PCR检测;8.Western Blot法检测PPARγ/SREBP-1c基因蛋白表达;9.SPSS统计并分析实验数据。结果:1.精神状态和体重变化:定期观察小鼠饮食量、精神状态、活动情况、皮毛光泽度和对外界的反应程度有所改善,均优于模型组。其中,健脾化浊降脂方高剂量疗效最好,高剂组小鼠体重较前下降明显,活动增多,粪便正常,中剂量次之;2.脂肪体积、含量与分布:与模型组比较,实验各给药组的内脏脂肪及脂肪总体积均显著降低,而高剂量同时可降低皮下脂肪,结果具有统计学差异(P<0.05)。表明各给药组均能有效减轻内脏脂肪含量、体积且疗效相当;脂肪分布含量及范围对比,表明各给药组主要作用于内脏脂肪,减少内脏脂肪分布,高剂量疗效最好,中剂量和西药次之,低剂量疗效相对不明显;3.对血脂、血糖的影响:高剂组和西药组在降低TC、TG等血脂谱相关指标上疗效相当;在降低Glu和Apo B上,高剂组疗效最好,西药组次之。健脾化浊降脂方三个梯度剂量组疗效高低对比按序依次是高剂量、中剂量和低剂量;4.对脂肪因子的影响:健脾化浊降脂方高剂量和西药可有效降低脂肪因子瘦素、抵抗素和胰岛素浓度以及升高血清脂联素浓度。健脾化浊降脂方中剂量次之,低剂量作用最弱;5.对促炎细胞因子的影响:实验各给药组均可以有效地降低血清中IL-6、TNF-α和FFA浓度,结果具有统计学差异(P<0.05),其中中药组高剂量疗效最好且与西药疗效相当,中剂量次之,再者是低剂量;6.对肝脏形态、湿重的影响:实验各给药组均能不同程度地恢复肝脏形态、质地和色泽,其中高剂量疗效最好,其次是中剂量,再者是西药和低剂量。各给药组均可降低肝脏湿重,缩小肝脏体积,结果具有统计学差异(P<0.05)且疗效相当;7.对内脏、皮下脂肪湿重及其系数的影响:与模型组比较,西药组、低剂组、中剂组、高剂组的内脏脂肪和皮下脂肪湿重及其系数,均有不同程度降低,结果具有统计学差异(P<0.05)。表明健脾化浊降脂方高剂量可有效降低内脏脂肪湿重,疗效最好;低剂量和西药影响皮下脂肪湿重,作用相当;8.对肝脏、脂肪组织形态学结构的影响:健脾化浊降脂方高剂量组肝脏形态结构恢复最好,胞浆内黄色脂滴空泡数量明显减少,细胞核位置恢复居中,肝细胞大小均匀,西药和中剂量疗效次之;各组小鼠脂肪细胞体积均有不同程度缩小,单位视野内脂肪细胞数目增多,健脾化浊降脂方高剂量疗效最好,其次是中剂量和西药组,而低剂量组可见炎性细胞浸润;9.对TNF-α和IL-6 mRNA相对表达的影响:健脾化浊降脂方三个梯度剂量和奥利司他能显著降低炎性因子TNF-α和IL-6 mRNA的相对表达,结果具有统计学差异(P<0.05),从而减轻炎症刺激,抑制炎症发生、发展。结果表明,健脾化浊降脂方高剂量和西药疗效相当,中剂量和低剂量次之;10.肝脏和脂肪组织中PPARγ和SREBP-1c蛋白表达:健脾化浊降脂方三个梯度剂量和奥利司他能显著降低SREBP-1c蛋白表达和增加PPARγ蛋白表达,结果具有统计学差异(P<0.05),从而产生调控代谢稳态的效应。结果表明,健脾化浊降脂方高剂量疗效最佳,其次是中剂量和西药。结论:1.健脾化浊降脂方具有显著的减肥作用,并能明显降血脂、降血糖,调节脂肪因子和促炎细胞因子,保持血清脂联素水平、降低局部炎症水平和改善代谢紊乱,使机体处于健康的代谢稳态。2.健脾化浊降脂方可有效减轻HFD诱导的肝损伤,使肝脏和脂肪组织形态学结构得以恢复。3.健脾化浊降脂方改善肥胖小鼠代谢紊乱和慢性炎症状态的作用机制可能是上调PPARγ基因和下调SREBP-1c基因的蛋白表达,下调TNF-α和IL-6基因的mRNA相对表达,从而产生调控代谢稳态及炎症的效应。综上所述,健脾化浊降脂方三个梯度剂量中高剂量疗效最佳,中剂量次之,再者是低剂量。脾胃运化和升清降浊功能的恢复可以有效调节生理性脂肪生成与代谢健康,为临床实践提供依据和理论支持。
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