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猪流行性腹泻病（PED）具有爆发急、传播速度快、致死率高的特点,对国家养猪业造成严重影响。因此,快速而灵敏地检测其致病病毒—猪流行性腹泻病毒（PEDV）对PED的防控具有重要意义。表面增强拉曼散射（Surface enhanced raman scattering,SERS）具有无损、灵敏度高、检测速度快等优点,已经在众多领域得到广泛应用。但快速识别和富集复杂样品中的目标物,在SERS应用领域仍是一种挑战。免疫磁珠（IMBs）具有良好的生物相容性,可以在溶液中自由扩散并借助外部磁体轻松分离,实现了对目标物的特异性识别和快速分离。本文将SERS技术与IMBs结合,通过引入生物素-链霉亲和素模式和滚环扩增模式,设计了两种SERS免疫传感器,用于PEDV的快速灵敏检测。主要研究内容及取得成果如下:1. 硅包金星与磁分离的蒲公英式放大SERS免疫传感器构建及其用于PEDV检测构建SERS-IMBs免疫传感器。通过化学键将拉曼信号分子对巯基苯甲酸（4-MBA）组装到金纳米星（Au NSs）表面,然后将附着4-MBA的Au NSs包裹二氧化硅壳层并在其表面修饰生物素（Biotin）,构成具有Si O2@4-MBA@Au NSs结构的生物素化SERS探针。通过羧基与氨基共价交联将单克隆抗体连接到磁珠表面构成免疫磁珠（IMBs）并作为病毒的捕获探针。待测PEDV与IMBs结合后再与生物素化的多克隆抗体结合,然后以链霉亲和素（Streptavidin,SA）作为桥联分子结合多个SERS探针,形成以磁珠为中心的类似蒲公英结构的免疫检测模式。该传感方法对PDEV的检测线性范围为5.3×104copies/u L～53 copise/u L,经计算其检测限为31.21 copies/u L,加标回收率的范围为94.34%～115.13%。2. 磁分离的滚环放大SERS免疫传感器构建及其用于PEDV检测利用滚环扩增（RCA）作为信号放大手段,并将SERS与免疫磁珠结合,构建SERS-RCA-IMBs免疫传感器:磁珠表面共价修饰单克隆抗体作为捕获探针,与待测PEDV结合后通过免疫识别作用与生物素化的多克隆抗体结合,再以SA作为桥联分子实现单个免疫夹心结构与多个生物素化引物DNA的连接。以环形DNA为模板,利用T4DNA连接酶,d NTP和phi29聚合酶实现RCA反应,使引物DNA被延长,形成具有多个重复片段的单链DNA。以信号分子内嵌式金核银壳纳米粒子为信号探针,并在其表面修饰与引物DNA重复片段部分互补的DNA构成Au@4-MBA@Ag NPs SERS探针。扩增的引物DNA通过重复片段结合大量SERS探针,实现SERS信号的放大。其中,SERS-RCA-IMBs传感器用于PEDV检测的线性范围为2.65×104 copies/u L～27 copies/u L,检测限为7.48 copies/u L,加标回收率范围为92.75%～104.91%。