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本课题期望得到刺五加果实部位中一种活性较强的均一分子量多糖，并分析其分子量、官能团构成及单糖组成。以高发性恶性肿瘤细胞系人肺癌A549细胞为研究对象，挖掘刺五加果多糖的抗肺癌活性，并从细胞增殖、凋亡、迁移三方面研究其抗肺癌机制。
本研究首先进行了提取方法筛选，以抗肺癌活性为目的，筛选了三种不同提取方法得到的粗多糖对肺癌A549细胞的抑制效果，结果发现热水浸提法得到的多糖对A549细胞抑制率最高，采用响应面的方法对热水浸提法进行提取条件优化。以优化条件提取刺五加果实，得到粗多糖，在用Sevage法脱去蛋白后，采用DEAE-52，SephadexG-200等柱层析方法对其进行纯化，结合活性追踪得到了一种均一分子量多糖ASPF，并测得ASPF中的糖含量为89.8％，糖醛酸含量为22.9％。
采用凝胶渗透色谱鉴定ASPF纯度，色谱图中呈现单一峰且峰形良好，说明ASPF分子量均一，采用GPC法测得其重均相对分子量Mw为97462。通过多种结构鉴定方法初步分析了ASPF的结构表征。结果显示ASPF中的糖基为吡喃构型，端基异头碳构型为β型。ASPF由Rha、GalUA、Glc、Xyl、Gal、Ara六种单糖组成，其摩尔比为1∶3.9∶1.5∶4.45∶0.56∶3.62，推测ASPF为一种果胶类多糖。
最后，本课题研究了ASPF对人肺癌A549细胞的体外作用效果及其机制。CCK-8法初步证明了ASPF对A549细胞的抑制效果，A549细胞存活率随给药浓度与用药时间的增加而逐渐降低，于25μg/mL时出现显著性，在200μg/mL出现极显著性，其IC50值为424.39μg/mL，相比较纯化前的664.6μg/mL，其活性有着较明显的提高。除此之外，ASPF还能够抑制A549细胞的迁移率。通过对Caspase酶活性检测以及凋亡基因mRNA表达量测定发现，ASPF能够作用于Bax与Bcl-2的mRNA表达，显著增强Caspase-3，8，9酶的活性，以达到共同促进细胞凋亡的效果。
本文分析了从刺五加果中提取得到的一种水溶性多糖ASPF的结构，并报道了其体外抑制肺癌A549细胞的活性与机制，证明了刺五加果实的药用价值与开发潜力。
本研究首先进行了提取方法筛选，以抗肺癌活性为目的，筛选了三种不同提取方法得到的粗多糖对肺癌A549细胞的抑制效果，结果发现热水浸提法得到的多糖对A549细胞抑制率最高，采用响应面的方法对热水浸提法进行提取条件优化。以优化条件提取刺五加果实，得到粗多糖，在用Sevage法脱去蛋白后，采用DEAE-52，SephadexG-200等柱层析方法对其进行纯化，结合活性追踪得到了一种均一分子量多糖ASPF，并测得ASPF中的糖含量为89.8％，糖醛酸含量为22.9％。
采用凝胶渗透色谱鉴定ASPF纯度，色谱图中呈现单一峰且峰形良好，说明ASPF分子量均一，采用GPC法测得其重均相对分子量Mw为97462。通过多种结构鉴定方法初步分析了ASPF的结构表征。结果显示ASPF中的糖基为吡喃构型，端基异头碳构型为β型。ASPF由Rha、GalUA、Glc、Xyl、Gal、Ara六种单糖组成，其摩尔比为1∶3.9∶1.5∶4.45∶0.56∶3.62，推测ASPF为一种果胶类多糖。
最后，本课题研究了ASPF对人肺癌A549细胞的体外作用效果及其机制。CCK-8法初步证明了ASPF对A549细胞的抑制效果，A549细胞存活率随给药浓度与用药时间的增加而逐渐降低，于25μg/mL时出现显著性，在200μg/mL出现极显著性，其IC50值为424.39μg/mL，相比较纯化前的664.6μg/mL，其活性有着较明显的提高。除此之外，ASPF还能够抑制A549细胞的迁移率。通过对Caspase酶活性检测以及凋亡基因mRNA表达量测定发现，ASPF能够作用于Bax与Bcl-2的mRNA表达，显著增强Caspase-3，8，9酶的活性，以达到共同促进细胞凋亡的效果。
本文分析了从刺五加果中提取得到的一种水溶性多糖ASPF的结构，并报道了其体外抑制肺癌A549细胞的活性与机制，证明了刺五加果实的药用价值与开发潜力。