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假高粱[Sorghum halepense(L．)Pers]是世界十大恶性杂草之一，被我国列为进境植物危险性有害生物。它有多个近似种，如黑高粱(S.almum)、光高粱(S.nitidum)、拟高粱(S.propinquum)、苏丹草(S.sudanense)和二色高梁(S. bicolor)等，在形态特征上极为近似，给鉴定带来了很大的难度；同时由于假高粱及近似种的种子往往夹杂在进出境的农产品中传播，其形态特征往往会因运输过程中的颠簸磨损而不完整或完全丢失，给准确鉴定假高粱及其近似种带来了很大的不确定性。为快速准确的检测假高粱及其近似种，本文在分析醇溶蛋白SDS-PAGE和DNA序列差异的基础上，建立了假高粱及其近似种的醇溶蛋白电泳和PCR检测方法。
参考国际种子协会(ISTA)推荐的醇溶蛋白研究方法，以高粱种子为材料，大麦、小麦、玉米等为参照，研究了不同提取剂、提取剂用量、浓度和还原剂浓度对高粱种子醇溶蛋白提取的影响。蛋白浓度测定和SDS-PAGE电泳表明，60％叔丁醇加入4％DTT、样品质量比提取剂用量为1:8(g/mL)为提取高梁种子醇溶蛋白的最佳条件。该条件下，提取高梁属不同种的种子醇溶蛋白，得到的高粱属种子醇溶蛋白的“指纹”图谱表明，种间醇溶蛋白谱带的条带数、带型以及深浅度存在差异，可以用来区分高粱属内各种。
据GenBank中二色高粱的一段927Kb的ChiB DNA序列设计一对通用引物D16/D18，PCR扩增并分析了假高粱及其近似种ChiB序列的差异，结果表明，假高粱与黑高粱的扩增产物为567-607bp，亲缘关系较近达97.5-100％，聚类分为一组；拟高粱、二色高粱等聚为一组，它们之间的相似度为95.1-97.6％；光高粱的遗传距离最远，与其他供试材料的相似度只有72.3-74.7％，自为一组。根据序列分析结果设计了特异引物D51/D55，可以鉴定检疫性杂草假高粱和黑高粱。
根据高粱属核糖体内转录间隔区(ITS)序列，设计引物S3/S9，PCR扩增和分析结果表明，二色高粱、喀麦隆高粱、假高粱、黑高粱的ITS部分序列长度为597bp，拟高粱的长度为598bp，属于同一组，亲缘关系较近为98.8-100％，多色高粱的长度为598bp，光高粱为602bp，二者亲缘关系较近为96.9-97.2％。序列分析结果支持将光高粱也归为多色高粱所在的拟似高粱区组。在分析序列的基础之上，设计的光高粱鉴定引物N3/N5，可以将光高粱从其它近似种中区分开来。利用乙醇脱氢酶1(Adh1)部分序列设计引物SW11/SW17，SW22/SW24，SW32/SW34，扩增了假高粱及其近似种的Adh1区段，对PCR产物进行了序列测定和分析，结果表明优高粱区组内二色高粱和假高粱、黑高粱的序列为1287bp，聚类分析分为一组，而拟高粱为1292bp，较之区组其它种的遗传距离为1.3-1.6，单独归为一组。据此设计了特异引物P1/P4，用PCR方法鉴定了拟高粱。