研究背景:小儿癫痫是一种神经系统综合征,它的病因及发作形式复杂,临床上以反复发作、刻板发作为特点,居儿童期脑部慢性疾病的第一位,是一种致残性的疾病。它主要因为大脑神经元被多种原因诱导致异常同步放电,进一步导致了中枢神经系统功能障碍。小儿癫痫严重影响患儿的身心健康,亦给家庭和社会带来了沉重的负担。癫痫中约30%为药物难治性癫痫(refractory epilepsy,RE),现有药物难以控制癫痫发作,需要手术治疗切除致痫灶。在手术治疗的难治性癫痫患儿中,约有75%为局灶性皮质发育不良(focal cortical dysplasia,FCD)。FCD是大脑皮质发育不良的亚型之一,其被认为是在胚胎发育早期神经元的正常程序(如增殖迁移分化等)受到干扰所致,其典型的病理改变是皮质分层异常和/或出现异形、异位神经元。FCD是小儿难治性癫痫中最常见的病理类型,根据其病理目前可分为单纯型(包括FCD I型、FCDII型)和结合型(FCDIII),每一分型又分为不同的亚型,其中FCDIII分为FCDIIIa型、FCDⅢb型、FCDⅢc型、FCDⅢd。核因子kappa B(NF-κB)是一种核蛋白因子,是细胞关键的转录因子之一,它可以与免疫球蛋白κB序列(位于k轻链基因增强子)特异结合,具有广泛的生物学活性,是多种细胞因子的上游调控因子。其中在中枢神经系统发挥作用的主要是P65?P50异源二聚体,其活性受IΚBa和IΚBB调控。NF-κB可被多种细胞外刺激信号激活,其DNA构象变化被诱发,使靶基因的转录被启动或增强,从而调节细胞因子、黏附因子、炎症反应有关的酶和趋化因子等与炎症有关的多种基因的转录。大量研究发现,NF-κB参与了癫痫发病中的急性炎症过程。研究证明,NF-κB除了参与调节TNF等细胞因子的表达,还与IL-8等趋化因子表达关系密切,因此,在炎症反应中,NF-κB通过调节细胞因子、趋化因子等表达发挥作用。另研究表明NF-KB与神经元可塑性密切相关,NF-κB通过海马突触传递长时程增强(Long termpotentiation,LTP)调节神经元突触结构和功能变化。很多的实验研究提示NF-κB核移位与癫痫的产生、发展与维持有密切的关系。目的:1 FCDIIIa是小儿难治性癫痫中常见的一种类型,其发病机制尚未清楚;2目前研究发现NF-κB与癫痫形成有关,其机制可能通过介导炎症反应实现,FCDIIIa作为难治性癫痫常见的病理类型,NF-κB在FCDIIIa中是否表达及是否参与其病理过程,还未见报道;3研究NF-κB(P65)在小儿难治性癫痫FCDIIIa型中的表达情况;4探索NF-κB(P65)在FCDIIIa发病机制中的作用。方法:选取2011年10月至2013年4月期间河北省人民医院功能神经外科行手术治疗的难治性癫痫患儿,筛选出26例FCDIIIa型难治性癫痫患儿临床手术切除的皮层致痫灶标本作为本研究的实验组,选取5例病理科尸检的正常皮层标本作为对照组,利用免疫组织化学染色、Western Blot等方法检测NF-κB(P65)在FCDIIIa型难治性癫痫患儿脑组织中的表达,并与正常脑组织的表达情况进行比较。实验数据采用SPSS13.0统计学软件进行分析。数据均以(均数±标准差)表示,两组间均数比较采用t检验,以P<0.05为差异有统计学意义。结果:实验组26例中,男16例、女10例,年龄2.5~14.0岁,平均年龄(8.81±2.98)岁;发病年龄0.5~7.0岁,平均发病年龄(4.31±1.84)岁;病程2~7年,平均病程(4.67±1.22)年。对照组5例,男3例、女2例,年龄4.0~12岁,平均年龄(7.80±1.23)岁。免疫组化结果:FCDIIIa患儿组,NF-κB(P65)高表达,平均每个视野NF-κB(P65)免疫反应阳性细胞为(2 8.9 5±5.1 0 3)个;对照组中,NF-κB(P65)呈低表达,免疫反应阳性细胞数为(7.20±2.280)个;两者差异有统计学意义(t=9.186,P<0.05);Western Blot检测NF-κB(P65)蛋白水平结果:NF-κB(P65)蛋白在FCDIIIa患儿皮层中高表达,其相对表达量为(49.2±9.88);在对照组中低表达,其相对表达量为(24.5±6.72),两组间差异有统计学意义(t=6.534,P<0.05)。结论:1 NF-κB(P65)在FCDIIIa患儿的大脑皮层中的表达显著高于对照组,说明NF-κB可能参与了FCDIIIa的形成过程。2 NF-κB(P65)可能通过某种机制被激活,活化的NF-κB可能通过介导炎症反应参与形成FCDIIIa的病理改变。