论文部分内容阅读
本论文以溶剂提取法、两相溶剂萃取法对树舌灵芝子实体[Ganoderma applanatum(Pers.)Pat]的化学成分进行了提取;同时以分离得到的各组分为受试物对化学性肝损伤的保护作用及抗炎镇痛作用进行了研究;以薄层色谱(TLC)、硅胶柱色谱、葡聚糖凝胶LH-20柱色谱等化学方法对活性组分石油醚提取物、乙酸乙酯提取物进行了分离、纯化、鉴定。首先,采用溶剂浸渍法提取树舌灵芝子实体中的有机化合物。树舌灵芝子实体干燥(40℃烘干),粉碎后,置于带盖不锈钢桶中,石油醚室温下浸提3次,合并三次提取液,减压浓缩得石油醚提取物。树舌灵芝粗粉挥至无醚味后再用95%乙醇浸提,方法同石油醚。得乙醇浸膏。将乙醇浸膏分散于水,依次用乙酸乙酯和正丁醇萃取,分别得到乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物。采用传统多糖提取方法(水提醇沉法)对树舌灵芝子实体的多糖进行提取,通过Sevage法除蛋白后,应用苯酚-硫酸法对其进行了总糖含量测定,结果表明,提取物总糖含量为57.1%。采用乙醇提取,碱提酸化法提取了树舌灵芝酸性组分。其次,应用四氯化碳诱导化学性肝损伤模型,初步研究了树舌灵芝石油醚提取物,乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物、多糖、酸性组分对化学性肝损伤的保护作用。结果表明,石油醚提取物(0.1 g/kg)、乙酸乙酯提取物(0.2 g/kg)及粗多糖(0.4 g/kg)均可抑制实验性肝损伤小鼠ALT及AST活力(P＜0.05,P＜0.01),提示对肝脏有保护作用。而石油醚提取物随剂量增加,ALT、AST值呈升高趋势,说明大剂量的树舌灵芝石油醚提取物可对肝脏产生毒性。正丁醇提取物各剂量与酸性组分作用相似,未见到明显保肝作用。采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀、扭体法、热板法研究了树舌灵芝上述5种提取物抗炎镇痛活性。结果表明,树舌灵芝石油醚提取物、正丁醇提取物、粗多糖对二甲苯所致炎症有明显的抗炎作用,其中,正丁醇提取物效果最好,对二甲苯致小鼠耳廓肿胀抑制率为30.2%;粗多糖对于化学性刺激(体积分数0.6%醋酸)引起的疼痛具有明显的镇痛作用,能有效降低因醋酸所致扭体反应数,镇痛百分率为37.2%。对于物理性刺激(热板法)引起的疼痛,粗多糖需要较长代谢时间才发挥明显的镇痛作用,明显延长小鼠热板痛阈值,此时粗多糖的镇痛作用较阿司匹林的镇痛作用强。而乙酸乙酯提取物、酸性组分并未表现出抗炎镇痛活性。最后,以薄层色谱(TLC),硅胶柱色谱、葡聚糖凝胶LH-20柱色谱等化学方法对石油醚提取物、乙酸乙酯提取物进行了分离、鉴定。石油醚提取物经硅胶柱色谱,以石油醚-乙酸乙酯系统洗脱后,反复重结晶,得化合物2,再经葡聚糖凝胶LH-20柱色谱,用乙酸乙酯洗脱,得化合物1。乙酸乙酯层经硅胶柱色谱,以氯仿-甲醇系统反复洗脱后,再经葡聚糖凝胶LH-20柱色谱,以甲醇为洗脱剂,得化合物3。化合物经理化检识,TLC、核磁共振波谱、质谱等分析鉴定方法并结合文献,鉴定化合物1-2分别为不饱和脂肪醇、麦角甾醇,化合物3待进一步鉴定其结构。