灵芝是我国传统的药食两用真菌，含有三萜、多糖、蛋白质、生物碱以及腺苷等多种活性成分，具有抗肿瘤、调节免疫、抗衰老等多种功效，故近年来灵芝的研究和开发备受关注，市场上各类灵芝产品繁多，但质量参差不齐，真假混杂难辨，如何鉴别真伪、控制质量成为亟需解决的问题。灵芝多糖作为灵芝的主要活性物质，现已成为灵芝类产品的分析检测与质量控制的主要研究对象。本课题即是针对不同来源的灵芝子实体样品，采用适当的方法提取其多糖并进行部分酸水解，应用不同色谱分析方法构建多糖指纹图谱，并结合化学计量学方法进行表征和鉴别研究，为提升灵芝类产品的分析检测和质量控制方法提供参考和依据，同时为进一步探索研究灵芝多糖的谱效关系奠定基础。为了更真实地表征灵芝多糖的信息，本课题以赤芝子实体为实验材料，优化最佳提取条件，力求既要有较高的提取效率，同时尽量不对多糖的结构有影响，最大限度地保留多糖最原本的特征。通过对超声辅助提取、微波辅助提取、加速溶剂萃取以及水浴回流提取等四种不同提取方法的提取温度、时间、料液比等因素进行单因素和正交试验优化，以多糖得率为指标，确定和比较各方法的最佳提取条件。同时以分子量大于10kDa的多糖级分含量为指标，比较不同提取条件对多糖分子量分布的影响，结果表明，四种提取方法对多糖分子量分布有一定影响，其中加速溶剂萃取、超声辅助提取以及水浴回流提取的多糖分子量大于10kDa级分的含量相差不大，对多糖的破坏均不大，而微波辅助提取对多糖结构的破坏相对较大。综合考虑两方面因素，最终确定最佳的提取方法及提取条件为：超声辅助提取法，超声温度70℃、超声时间50min、料液比1:20。采用优化确定的超声辅助提取法提取了37个不同来源的灵芝样品的多糖，并进行部分酸水解后，进行PMP柱前衍生化反相色谱分析，运用专用指纹图谱软件分别建立了赤芝子实体、紫芝子实体及赤芝孢子粉多糖标准指纹图谱，分别确定了18、16及16个共有特征峰。对共有峰进行标准品对照和液质联用分析定性，确定赤芝子实体、紫芝子实体及赤芝孢子粉的多糖指纹图谱中的共有特征峰分别有10个单糖峰和8个寡糖峰、9个单糖峰和7个寡糖峰以及9个单糖峰和7个寡糖峰。同时对11个赤芝子实体、10个紫芝子实体以及11个赤芝孢子粉和5个紫芝孢子粉样品多糖的指纹图谱进行相似度评价。结果显示，相同种属相同部位的灵芝多糖的相似度较高，相同部位不同种属的灵芝多糖的相似度较低。同时将指纹图谱的共有峰面积数据进行聚类分析以及主成分分析，通过聚类树状图以及主成分得分图可以直观地反映不同来源灵芝多糖之间差异。为增强灵芝多糖部分水解产物中的寡糖信息进而更好地表征灵芝多糖，以同一浓度葡萄糖标样为参照外标，对分别在C18反相柱（用于PMP柱前衍生化反相色谱分析）和Sugar-Pak糖柱两个色谱柱系统下得到的单糖和寡糖信息进行数据转换整合后，进行化学计量学分析。结果显示，该方法也可以很好地表征灵芝子实体多糖的指纹特征聚类树状图以及主成分得分图均可以直观地显示灵芝子实体多糖与灵芝孢子粉多糖之间的明显差异，结果与PMP柱前衍生化反相色谱指纹分析结果相似。对相同提取条件下得到的多糖分子量分布进行分析研究，并对不同多糖的分子量图谱进行分段切割后得到的数据进行聚类分析。结果显示,不同灵芝样品的多糖分子量分布均有差异；相同部位的赤芝多糖因菌株、产地以及栽培方式等不同而存在一定的差异，通过对分子量图谱色谱数据的聚类分析可以区分；不同部位的赤芝多糖也有明显的区别，通过聚类分析可以将子实体多糖和菌丝体多糖明显区分；赤芝子实体多糖大多数以分子量在10kDa~100kDa的多糖组分为主，赤芝孢子粉多糖大多同时含有分子量10kDa~100kDa、100kDa~1000kDa乃至MW>1000kDa的多糖组分，而赤芝菌丝体多糖多以分子量10kDa~100kDa以及100kDa~1000kDa的组分为主。