叶酸修饰半乳糖化壳聚糖—氟尿嘧啶纳米载药体系的制备及表征

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研究背景与目的:随着生活水平的提高,癌症尤其是肝癌成为威胁人类健康的主要因素,因此肝癌的治疗势在必行,但是传统的肝癌治疗方法不能达到理想的治疗效果,随着纳米技术的兴起,研究者将目光集中于靶向纳米载药体系在肝癌治疗方面的应用。本课题拟通过化学合成将叶酸(Folic acid,FA)引入到实验室前期合成的半乳糖化壳聚糖-氟尿嘧啶(GC-FUA)上制备并表征出FA修饰的半乳糖化壳聚糖-氟尿嘧啶—叶酸-半乳糖化壳聚糖-氟尿嘧啶(FA-GC-FUA)。进一步制备并表征FA-GC-FUA纳米体系(FA-GC-FUA-NPs)。方法与结果:1.通过酰胺反应制备出FA-GC-FUA,用紫外(UV)、红外(FT-IR)和核磁(~1H-NMR)对FA-GC-FUA的化学结构进行表征。结果均显示已经成功制备出FA-GC-FUA。2.利用在酸性条件下,壳聚糖(Chitosan,CS)带正电,FA带负电,通过静电自组装的方法来制备FA-GC-FUA纳米体系(FA-GC-FUA-NPs)。从纳米粒子的粒径和分散度、纳米粒子的载药量、纳米粒子的稳定性和纳米粒子的释药特性来评价其质量。纳米粒度仪的结果显示FA-GC-FUA-NPs的平均粒径为105±10nm,分散度为0.27±0.2;UV结果显示FA-GC-FUA-NPs的载药量为18.71%;纳米稳定性结果显示在168h内,FA-GC-FUA-NPs都很稳定;动态透析法结果显示与游离5-Fu相比,FA-GC-FUA-NPs具有明显的缓释特性,且存在一定的p H依赖性。3.蛋白吸附实验和溶血实验结果显示FA-GC-FUA-NPs具有良好的体外生物相容性;正常肝细胞LO2和内皮细胞ECs的MTT结果显示FA-GC-FUA-NPs具有良好的体外生物相容性;肝癌细胞HepG2的MTT结果显示FA-GC-FUA-NPs具有比较强的体外抗肿瘤效果和一定的缓释特性。结论:成功合成了FA-GC-FUA并制备了FA-GC-FUA-NPs。该纳米体系变现了良好的缓释特性、稳定性、体外生物相容性和体外抗肿瘤作用。
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