研究目的检测Ⅱ型cGMP依赖性蛋白激酶(cGMP dependent protein kinaseⅡ,PKGⅡ)在肿瘤细胞高表达对增殖相关信号转导通路MAPK/ERK的影响。研究PKGⅡ在基因调控中的作用。研究方法(1)构建携带PKGⅡ基因的腺病毒载体。(2)筛选对PKGⅡ腺病毒感染敏感的胃癌细胞,感染PKGⅡ腺病毒,以8-pCPT-cGMP特异性激活PKGⅡ,通过Western blotting方法检测ERK、Raf和Ras蛋白活性的变化,研究PKGⅡ对MAPK增殖相关信号转导通路的影响。(3)以PKGⅡ腺病毒感染胃癌细胞BGC-823,以8-pCPT-cGMP特异性激活PKGⅡ,用mRNA差异显示技术检测PKGⅡ在基因调控中是否存在作用。研究结果(1)成功构建了携带PKGⅡ的腺病毒载体。(2)用PKGⅡ腺病毒感染人胃癌细胞BGC-823、AGS和SGC-7901,使其PKGⅡ表达增高,并以8-pCPT-cGMP特异性激活PKGⅡ,使得EGF引起的ERK的磷酸化(活性)增高受到显著抑制。(3)用PKGⅡ感染腺病毒人胃癌细胞BGC-823、AGS和SGC-7901,使其PKGⅡ表达增高,并以8-pCPT-cGMP特异性激活PKGⅡ,使得EGF引起的Raf的磷酸化(活性)增高受到显著抑制。(4)用PKGⅡ腺病毒感染人胃癌细胞BGC-823和SGC-7901使其PKGⅡ表达增高,并以8-pCPT-cGMP特异性激活PKGⅡ,使得EGF引起的Ras蛋白活性增加受到显著抑制。(5)在代表性细胞BGC-823细胞中,未见PKGⅡ对基因调控有明显的影响。结论在人胃癌细胞中,PKGⅡ可抑制MAPK/ERK信号通路的转导,表现为对Ras、Raf以及ERK的活性均有抑制作用;PKGⅡ对基因调控的作用尚未明确。