人骨髓间充质干细胞体外成骨分化及与Bio-gide胶原膜复合培养的实验研究

来源 :南昌大学医学院 南昌大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chenzulong198867
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目的:本实验拟研究人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stem cells,hMSCs)分离、培养与鉴定的方法,观察其成骨细胞表型特征,探讨其作为牙周组织工程种子细胞的可行性;将Bio-gide胶原膜与hMSCs进行体外复合培养,行形态学观察。方法:体外分离培养hMSCs,进行形态学观察,增殖测定,细胞表面抗原检测;取生长状态的良好的第三代hMSCs,分别于不同培养条件下(实验组:成骨诱导液;对照组:普通培养液)进行培养,检测细胞碱性磷酸酶表达及矿化能力。将hMSCs与Bio-gide胶原膜进行体外复合培养,通过倒置相差显微镜,扫描电镜进行观察。结果:梯度密度离心法结合贴壁筛选法能获得高纯度高活性的hMSCs。经成骨诱导后可表达高水平碱性磷酸酶活性(p<0.05),连续培养28天左右可形成矿化结节。hMSCs可在Bio-gide胶原膜上贴附增殖,并复层生长。结论:hMSCs取材方便、创伤小;具有成骨分化潜能,经诱导后具有成骨细胞表型特征。hMSCs可作为牙周组织工程种子细胞来源。Bio-gide胶原膜可作为细胞生长载体,有望成为hMSCs的支架材料应用于牙周组织工程研究。
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