目的 研究内毒素对小鼠、金黄地鼠及人精子的体外获能和顶体反应、小鼠精卵结合及小鼠1-细胞、2-细胞和去卵透明带2-细胞胚胎体外发育的影响，探讨内毒素影响体外受精结局的环节及可能的机制，确定三个体外培养系统对内毒素的敏感性，以期为临床和实验室质量控制提供参考。 方法 取小鼠精子10份、金黄地鼠精子6份、人新鲜精液标本10份及人冷冻精液标本9份，分别与不同浓度内毒素共孵育进行体外获能和孕酮诱导的顶体反应，应用金霉素和DNA结合的荧光染料Hoechest 33258双重荧光染色法检测精子的获能率和顶体反应率；小鼠体外受精实验的精卵结合环节培养液中加入不同浓度的内毒素，观察受精情况并记录受精率；取小鼠1-细胞胚胎、2-细胞胚胎和去卵透明带2-细胞胚胎，与不同浓度内毒素共孵育进行体外培养，观察体外发育情况并记录囊胚率。 结果 1．对照组小鼠精子获能率在孵育时间内波动不大(P＞0.05)，1.0μg/mL组60min时获能率显著高于0min时的获能率(P＜0.05)，且此时0.1μg/mL和1.0μg/mL组的精子获能率显著高于对照组的获能率(P＜0.05)。90min时，0.1μg/mL和10.0μg/mL组的获能率显著低于对照组和1.0μg/mL组的获能率(P＜0.05)。 2．空白对照组6.5h时的地鼠精子获能率显著高于0min时的获能率(P＜0.05)，而1.0μg/mL组5.5h的精子获能率显著高于0min时的获能率(P＜0.05)。 3．空白对照组的人新鲜精子获能率在孵育的7h内变化不大(P＞0.05)，而0.1μg/mL组7h时的精子获能率显著高于0min时的获能率(P＜0.05)。 4．空白对照组的人冷冻精子8h时的获能率显著高于0min，而10.0μg/mL组，精子获能率则在6h时显著高于0min的获能率(P＜0.05)。 5．在小鼠，随培养液中内毒素含量的增加，孕酮诱导的精子顶体反应率随之下降，且10.0μg/mL组的顶体反应率显著低于空白对照组及其它2个实验组(P＜0.05)； 在地鼠，则随培养液中内毒素含量的增加，其精子的顶体反应率随之增加，到 1．opg／InL时达到最高，然后随内毒素浓度增加，精子的顶体反应率有下降趋势； 在人，10．opg／mL组的精于顶体反应率显著高于对照组和其它 2个实验组 （P＜0．05）。 6．内毒素对小鼠精卵结合有明显的毒性作用，其毒性呈一定的剂量关系，表现为0＊ Vg／毗组的受精率与对照组相比显著降低（P＜o．05人1．okg／mL实验组的受精率 更低，与对照组相比差异显著（P＜o．皿1）。 7＊一细胞小鼠胚胎体外发育系统对内毒素最敏感，lpg／tnL时即有明显的毒性作用 （P＜0刀5人 在印旮InL时，对三种小鼠胚胎体外发育系统都有影响o＜0刀5），其 中，对去卵透明带2一细胞小鼠胚胎的影响出现较早，4一细胞期就有影响。 mp旮＜L对1一细胞和去卵透明带2一细胞小鼠胚胎有影响（P＜队05），lp旮m上和 10pg／毗对2一细胞小鼠胚胎体外发育则无影响沪＜0．05人 结论 1．内毒素使小鼠、金黄地鼠和人精于获能的高峰期提前，且对人冷冻精于体 外获能的影响比人新鲜精子更加显著。 2．内毒素对孕酮诱导的精子顶体反应率的影响呈现不同的趋势。在小鼠，顶 体反应率随内毒素浓度的增加而降低，在地鼠，则呈一定的剂量关系，在 1．0卜ymL时达最高，随后呈降低趋势，对人精于随内毒素浓度的增加而 增加，10．opg／InL达最高。 3．内毒素对小鼠精卵结合有明显的毒性作用，其毒性呈一定的剂量关系。 4．三个体外培养系统对内毒素的敏感性不同。l一细胞小鼠胚胎体外发育系 统最敏感，同一剂量时，对去卵透明带2一细胞胚胎的影响出现较早，而 2一细胞小鼠胚胎对内毒素敏感性最低。