3个‘北醇’新品系葡萄病毒检测与脱毒技术研究

来源 :宁夏大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:rqcai
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本试验以酿酒葡萄‘北醇’的三个新品系‘北醇11’、‘北醇12’、‘新北醇’为试验材料,探究植株不同部位中常见病毒含量,并建立这3个品系脱毒快繁体系,结果表明:(1)应用RT-qPCR技术检测进行病原鉴定选定的3个品系植株不同部位,测定样品中含有 GLRaV-1、GLRaV-2、GLRaV-3、GLRaV-4、GLRaV-7、GVA、GVB、GVE、GFabV、GRSPaV、GPGV、GFkV等12种病毒,同一品系不同部位病毒种类不同,含量也不相同。‘北醇11’植物体内不同部位病毒含量差异显著,在所检测12个病毒中,整个植株均有感染,感染病毒的相对表达量不同,叶柄中病毒种类最多,为10种,新稍次之,含有9种病毒,最少的为叶片,只含有2种病毒,分别为沙地葡萄茎痘相关病毒(GRSPaV)和葡萄病毒病E(GVE)。‘北醇12’叶柄中病毒种类最多,为10种,新稍次之,含有9种病毒,最少的为叶片,只含有两种病毒,分别为沙地葡萄茎痘相关病毒(GRSPaV)和葡萄病毒病E(GVE)。‘新北醇’在所检测的12种病毒中,叶片中病毒种类最多,含8种病毒;根系中次之根系中含有6种,枝干中含4中病毒。(2)在‘北醇11’、‘北醇12’、‘新北醇’组织培养中,不同的采样时间、消毒方式和不同激素浓度的培养基对组织培养外植体生长情况的影响不同。初代培养时,葡萄单芽茎段用酒精消毒1min,再用15%双氧水消毒6min组合消毒效果最好,3个品系的最佳启动培养基均为MS培养基+1.0 mg·L-1 6-BA+0.3 mg·L-1 NAA。组培苗茎尖培养最适培养基为1/2MS 培养基+2.0mg·L-16-BA mg.L-1+0.1 mg·L-1NAA,生根培养基中 NAA 和 IBA 组合使用对生根指数影响显著,最适的激素浓度为1/2MS培养基+0.2 mg.L-1IBA mg·L-1+0.4 mg·L-1NAA。(3)脱毒过程中,采用茎尖培养和药剂处理两者相结合的方式获得更好的脱毒效果,在使用茎尖培养和15mg/L病毒唑脱毒方式脱毒后所检测的植株最后脱毒率达到100%,所有病毒均脱除。在使用茎尖培养和3g/L板蓝根脱毒方式所检测的植株中,‘北醇11’只有GVB病毒未脱除;‘北醇12’中GVE病毒和GFkV病毒未脱除;‘新北醇’中所检测病毒全部脱除。
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