EBV疫苗的初步研究

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Epstein-Barr Virus(EBV)属于人类γ疱疹病毒家族成员,又称人类疱疹病毒4型(HHV-4),是最早被发现的人类肿瘤病毒。EBV感染很普遍,全世界超过95%的人曾经感染EBV。EBV是引起传染性单核细胞增多症(infectious mononucleosis,IM)的主要原因,其同时与多种恶性肿瘤相关,如鼻咽癌(Nasopharyngeal carcinoma,NPC)、胃癌(Gastric carcinoma)、霍奇金淋巴瘤(Hodgkin lymphoma,HL)和伯基特淋巴瘤(Burkitts lymphoma,BL)。据统计,全球每年大约有84000例EBV相关的胃癌病例,78000例EBV相关的鼻咽癌病例以及28000例EBV相关的霍奇金淋巴瘤病例。因此,开发EBV疫苗用于预防或治疗这些疾病具有极大的临床意义。然而,目前还没有针对EBV初始感染的预防性疫苗以及EBV相关恶性肿瘤的治疗性疫苗问世。本研究利用杆状病毒双启动表达系统(Bac-to-Bac系统)成功构建了三株表达EBV衣壳蛋白的重组病毒:vAc-BDLF1/B CLF1、vAc-BORF1/BdRF1和vAc-BVRF2/BFRF3。将这三株重组病毒同时感染Sf9细胞后制备EBV病毒样颗粒体(virus-like particles,VLPs),利用小鼠模型联合人用免疫佐剂进行动物实验来评价VLPs刺激产生的体液免疫水平,同时利用EBV高效感染细胞模型检测VLPs在细胞水平对EBV的阻断效果。研究结果表明:在体液免疫水平方面,EBV VLPs和灭活EBV均能刺激机体产生基本一致水平的特异性抗体,但对EBV的中和能力方面,EBV VLPs并不能有效阻断病毒感染宿主细胞。另外,本研究利用Bac-to-Bac昆虫细胞真核表达系统,成功表达出带组氨酸标签的全长型和胞外段EBV膜蛋白并对其纯化条件进行初步优化,同时利用BALB/C小鼠模型来评价纯化的EBV膜蛋白刺激产生的体液免疫水平,后续利用EBV高效感染模型检测纯化的EBV膜蛋白在细胞水平对EBV的阻断效果。结果表明:全长型的EBV膜蛋白gH和gB能在细胞水平阻断病毒感染,是很有开发前景的疫苗。
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