鳙对茜素络合物标记的应激响应及其标记放流效果的研究

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近年来,由于城市河流污染加重,水利设施的过度兴建,违法捕鱼日益严重等原因导致鱼类资源大幅度减少,为了恢复生态环境与鱼类资源量,增殖放流活动日渐重要。放流效果的监测与评估需要有效的回捕数量,而放流鱼类的回捕率与标记方法的选择密切相关。茜素络合物(alizarin complexone,ALC)是一种可用于鱼类人工增殖放流的荧光标记物质。该物质对于大规模的人工增殖放流活动,有价格低廉、标记存留时间长等优点,为放流效果的评估提供了相对简便和廉价的检测手段。但一定浓度的茜素络合物浸泡标记,对鱼体有一定毒性,浓度越大,死亡率通常也会更高,且鱼体对ALC的耐受性存在种间差异和个体大小差异,因此,本研究选用不同的标记条件对鳙进行标记,根据ALC对鱼类可能产生的应激响应及标记效果,确定较适宜的标记条件,进行大规模标记放流,并初步评估灞河城市段流域的增殖放流的效果。主要结果如下:1、茜素络合物适宜作为鳙荧光标记的药物使用,根据荧光标记效果及其应激反应结果,发现对鳙进行荧光标记较适宜的浸泡浓度是100mg/L,浸泡时间是48h。2、通过对比不同荧光下不同耳石的标记效果,发现微耳石是检测茜素络合物对鳙荧光标记最适宜的耳石类型,且在蓝色荧光下观察效果最佳。3、根据不用浸泡密度(20、40、50尾/L)下荧光标记的效果,发现浸泡密度对于荧光标记效果影响不大,考虑经济成本、劳动力大小、标记效果、存活率等因素,认为较适宜的浸泡密度是50尾/L。4、通过测定不同浓度(0、50、100、200mg/L)茜素络合物标记条件下应激相关的生物标志物,包括测定cat、cyp1a、mn-sod、cu/zn-sod、gpx、gr、gst、hsp70的mRNA相对表达水平;SOD、CAT、Gpx、GST、GPT和GOT酶活力及H2O2、MDA的含量的变化,发现用浓度小于等于200mg/L的茜素络合物标记鳙时会出现应激响应,但是这种应激相应并未造成严重的损伤,随着时间推移,机体会恢复到正常的状态。5、根据茜素络合物的标记效果,发现茜素络合物的标记浓度大于等于100mg/L时,鳙微耳石荧光标记至少能保存1年以上的时间。6、根据鳙在灞河城市段流域放流的生长变化结果,发现鳙的生长状况良好。从本研究的结果来看,茜素络合物对鳙较适的标记条件是浸泡浓度是100mg/L,浸泡时间是48h,浸泡密度是50尾/L。该条件下标记效果良好,标记后会出现应激响应,但是这种应激相应并未造成严重的损伤,随着时间推移,机体会恢复到正常的状态。且用茜素络合物对鳙进行标记放流的效果良好,能长时间的监测放流情况。
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