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目的
探讨抗原负载DC-CIK(cytokine-induced killer)对B16黑色素瘤的抑制作用。
方法
提取小鼠骨髓干细胞,分别用GM-CSF和IL-4法诱导培养DC,并以肿瘤全细胞冻融法将DC进行肿瘤抗原负载;用IL-2、IFN-γ和CD3单克隆抗体诱导获得CIK细胞。将肿瘤抗原负载DC与CIK细胞按1∶10的比例共培养,即为抗原负载的DC-CIK细胞。建立B16黑色素瘤小鼠模型,将30只C57BL/6N黑色素瘤模型小鼠随机分成3组,分别于瘤体周围皮下注射CIK细胞、抗原负载DC-CIK细胞,以生理盐水作为对照组,测量治疗前、后的肿瘤体积,计算抑制率:免疫组织化学和阳性胶体铁染色法,检测MMP-3与蛋白多糖在不同治疗组中的表达;透射电镜法,观察CIK细胞、抗原负载DC-CIK细胞在肿瘤组织中的分布及杀伤肿瘤细胞作用的形态学表现。
结果
抗原负载DC-CIK细胞组抑瘤作用(86.57%)强于CIK细胞组(33.34%)(P<0.05);MMP-3于抗原负载DC-CIK细胞组的表达弱于CIK细胞组(P<0.05);蛋白多糖于抗原负载DC-CIK细胞组的表达强于CIK细胞组(P<0.05)。透射电镜下抗原负载DC-CIK细胞体积大,核有切迹,细胞质内细胞器丰富及一些微颗粒,粗面内质网扩张。抗原负载DC-CIK常以点和面的形式与肿瘤细胞进行膜接触,或以突起深入肿瘤细胞细胞质内使肿瘤细胞发生不同程度的变化,并引起肿瘤细胞凋亡或坏死。
结论
抗原负载DC-CIK细胞的抑瘤作用强于CIK细胞;抗原负载DC-CIK细胞有诱导肿瘤细胞凋亡或坏死的作用;根据MMP-3与蛋白多糖的表达,可以预测CIK、抗原负载DC-CIK细胞等免疫过继细胞的抗肿瘤作用