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目的:通过建立单侧输尿管梗阻(Unilateral ureteral occlusion,UUO)大鼠模型,研究虫草益肾方对肾间质纤维化大鼠肾功能、肾脏病理以及对Sonic Hedgehog信号通路相关蛋白超音速刺猬因子(Sonic Hedgehog,Shh)、膜受体蛋白Patched(Ptch1)、G蛋白偶联受体蛋白Smoothened(Smo)、胶质瘤相关癌基因同源蛋白1(锌指蛋白5)(Glioma-associated oncogene homolog 1,Gli1)的影响,探讨肾间质纤维化发生机制和虫草益肾方在抗肾间质纤维化过程中可能存在的作用机制。方法:将100只SPF级雄性SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、虫草益肾方组及厄贝沙坦组,每组20只。采用左侧输尿管梗阻法建立肾间质纤维化模型,模型制备术后第1天开始灌胃,虫草益肾方组给予每日6.57g/kg虫草益肾方水煎剂灌胃,厄贝沙坦组给予每日13.5mg/kg厄贝沙坦水溶液灌胃,正常组、假手术组与模型组给予等体积蒸馏水灌胃,每日一次。观察大鼠一般状态,分别于第6天及第13天,各组别随机选取10只大鼠放入代谢笼中24小时,禁食不禁水,收集尿液,记录尿量,用于检测24小时尿蛋白定量(24hUPQ);于第7天、第14天处死大鼠收集血清,用于检测生化指标(血清肌酐、血清尿素氮);收集肾组织,应用HE、Masson染色观察肾脏病理改变,选择第14天肾组织,应用免疫组织化学技术检测Shh、Ptch1、Smo、Gli1蛋白的表达与分布,Real-Time PCR法检测Shh mRNA、Ptch1 mRNA、Smo mRNA、Gli1 mRNA转录的水平,Western Blot法检测Shh、Ptch1、Smo、Gli1蛋白的表达。结果:1.模型组大鼠状态不佳,皮毛暗淡,反应迟钝,活动减少,喜蜷卧,饮食量较正常组、假手术组大鼠明显减少,虫草益肾方可以明显改善UUO大鼠一般状态,在皮毛色泽、精神状态、摄食量以及体重增长方面均优于模型组与厄贝沙坦组。2.模型组24h尿蛋白定量、血清肌酐及血清尿素氮与同时间点正常组、假手术组相比明显升高(P<0.05);虫草益肾方组及厄贝沙坦组分别与模型组相比,可降低UUO大鼠24h尿蛋白定量、血清肌酐及血清尿素氮水平(P<0.05)。3.HE及Masson染色结果显示:虫草益肾方可改善UUO大鼠肾脏的病理变化程度,可减少UUO大鼠肾组织纤维化面积百分比,降低大鼠肾脏脏器系数,与模型组比较有统计学意义(P<0.05)。4.免疫组化结果显示:14天时,模型组大鼠肾组织中Shh、Smo、Gli1蛋白表达与正常组、假手术组相比明显增加(P<0.05),Ptch1蛋白表达低于正常组、假手术组(P<0.05);虫草益肾方组、厄贝沙坦组大鼠肾组织中Shh、Smo、Gli1蛋白表达均少于模型组(P<0.05),Ptch1蛋白表达高于模型组(P<0.05)。Shh、Ptch1蛋白表达在肾皮质肾小管胞浆及胞核,Smo、Gli1蛋白表达在肾皮质肾小管胞浆。5.Real-Time PCR结果显示:14天时,模型组大鼠肾组织中Shh mRNA、Smo mRNA、Gli1 mRNA转录水平与正常组、假手术组相比升高明显(P<0.05),Ptch1 mRNA转录水平低于正常组、假手术组(P<0.05);与模型组相比,虫草益肾方组与厄贝沙坦组可以下调Shh mRNA、Smo mRNA、Gli1mRNA转录(P<0.05),Ptch1 mRNA转录水平高于模型组(P<0.05);与厄贝沙坦组相比,虫草益肾方组Shh mRNA转录的水平更低(P<0.05)。6.Western Blot结果显示:14天时,模型组大鼠肾组织中Shh、Smo、Gli1蛋白表达与正常组、假手术组相比明显升高(P<0.05),Ptch1蛋白表显著降低(P<0.05);与模型组相比,虫草益肾方组与厄贝沙坦组可以使Shh、Smo、Gli1蛋白表达下调(P<0.05),Ptch1蛋白表达上调(P<0.05)。结论:1.虫草益肾方可以改善UUO大鼠的一般状态,能够增加UUO大鼠的体重与尿量。2.虫草益肾方可以降低UUO大鼠24h尿蛋白定量、血清肌酐及血清尿素氮水平,改善UUO大鼠肾脏功能。3.虫草益肾方可以改善UUO大鼠因输尿管梗阻导致的肾脏病理变化。4.虫草益肾方可以通过对Sonic Hedgehog信号通路基因水平的调控,延缓肾间质纤维化,其作用可能与下调Shh mRNA、Smo mRNA、Gli1 mRNA转录,上调Ptch1 mRNA转录有关。5.虫草益肾方可以通过对Sonic Hedgehog信号通路蛋白水平的调控,下调Shh以及下游Smo、Gli1蛋白表达,上调Ptch1蛋白表达,从而起到延缓肾间质纤维化,保护肾脏功能的作用。