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1.二甲基苯蒽诱导大鼠乳腺癌模型复制目的：确定DMBA诱导SD大鼠乳腺癌的合适给药时间终点。方法：40只大鼠一次灌胃10Omg/kg DMBA造模,对照组10只灌胃等量橄榄油。成瘤后,每周测量肿瘤长短径,回归成瘤率的半数有效时间(ET50)。结果：成瘤率的ET50及95%置信区间分别为1960h和1843-2095h,相关方程为Y=-1.695+91.985/(1+1013.74169-4.173x), R2=0.99。结论：DMBA诱导大鼠乳腺癌合适给药终点为模型建立后第12周(81.7天)。2.量效关系确定清毒颗粒抗乳腺癌的主导免疫细胞目的：量效关系确定主导清毒颗粒抗乳腺癌的免疫效应细胞。方法：d00,SD大鼠90只一次灌胃DMBA造模,对照组10只灌胃橄榄油。在d91,按肿瘤系数排序,中间5只用于模型组,旁侧27只用于清毒颗粒组,再旁侧18只用于SSa组；对清毒颗粒组(0.0107-107g/kg)与SSa组(0.0153-153mg/kg)动物,按肿瘤指数再均衡分9个剂量组(k=0.316)；对照组与模型组每天lO.OmL/kgCMC灌胃8周。d147,处死大鼠,曲线下面积(AUC)计算抑瘤率,回归量效曲线折算非SSa成分增加SSa的倍数。免疫组化与形态计量肿瘤组织内Ki-67、CD4、CD8、F4/80、CD57原位表达总量；计算各剂量组四种免疫细胞增加率。结果：清毒颗粒与SSa半数有效剂量(ID50)分别为7.82nmol/kg/d和179.5nmol/kg;非SSa增效SSa作用23倍。癌细胞增殖活性与对数剂量呈直线负相关；CD4+T细胞、CD8+T细胞、巨噬细胞(F4/80)与NK细胞(CD57)效应标志物含量增加与对数剂量呈直线正相关,斜率分别为KF4/80>KCD4>KCD8>KCD57。结论：CD4+T细胞与巨噬细胞为清毒颗粒主导性抗乳腺癌的免疫效应细胞。3.清毒颗粒抗乳腺癌免疫药效与药理的初步观察目的：初步观察清毒颗粒抗乳腺癌免疫的药效与药理。方法：doo灌胃DMBA复制大鼠乳腺癌(ni=150),灌胃橄榄油作为对照(ni=20)。d91,按肿瘤系数均衡随机分为7组,模型组,三苯氧胺(TAM)组,柴胡皂苷a(SSa)组,氟西汀(FXT)组,清毒颗粒低(QDL)、中(QDM)、高剂量(QDH)组。每天灌胃给药,每周测量肿瘤体积；d147处死大鼠,计算抑瘤率；检测肿瘤体积和增殖癌细胞,检测肿瘤浸润淋巴细胞；检测大鼠血清中IL-12、IFN-γ、IL-4和IL-10含量；免疫组化,实时定量RT-PCR和Western blot检测肿瘤组织内IL-12, IL-12R与pSTAT4的表达。结果：清毒颗粒显著抑制肿瘤生长,抑瘤率分别为30.93%,43.84%,44.17%；抑制癌细胞增殖,上调血清中IL-12、IFN-γ含量,下调IL-4、IL-10含量；增加免疫细胞浸润,下调CD47、SIRPa的表达。清毒颗粒升高IL-12、IL-12R与pSTAT4原位蛋白表达、基因水平和蛋白含量。结论：清毒颗粒抗乳腺癌具有“下调免疫逃逸与上调抗肿瘤免疫”双重免疫药效。