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目的卵巢功能损伤尚无确切有效防治策略。本研究旨在利用果蝇平台探讨植物提取物绞股蓝皂苷对年龄累积性卵巢损伤的保护作用及其内在机制。方法1)在中药系统药理学数据库及分析平台（Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform,TCMSP）中获取绞股蓝皂苷相关作用基因靶点信息后,与从Gene Cards及OMIM人类疾病基因数据库中搜集到的与卵巢功能损伤的相关基因进行比对。将比对后两者重叠的靶点基因认为是绞股蓝皂苷对抗卵巢功能损伤的目标基因,并对这些基因进行生物信息学分析,包括Gene Ontology以及KEGG pathway分析。2)在黑腹果蝇模式动物平台,基于雌性果蝇在羽化22-28天时产卵数减半的特征,将黑腹果蝇w1118随机分为空白对照组,羽化1天-死亡绞股蓝皂苷（gypenosides,GP）用药组,羽化1-25天GP用药组及羽化25天-死亡GP用药组,每组均有100只果蝇。通过统计雌性与雄性果蝇的平均寿命、半数死亡时间及最高寿命来判断GP可否在不同时间窗口对雌雄果蝇的寿命产生影响,同时对各组雌性果蝇的产卵数目及孵化率进行比较,以观察各组果蝇卵巢功能的变化情况。另外,在GP处理30天后进行应激相关实验（高糖饮食、饥饿饮食）以探索GP是否可以延长健康寿命。结果1)生物信息学分析中Gene Ontology结果表明,绞股蓝皂苷可以参与细胞增殖、氧化应激、甾体激素合成相关过程;KEGG pathway分析表明,PI3k-AKT通路为富集到的最有意义的通路,同时发现FOXO、TNF及Insulin通路也同样参与了生物调节过程,揭示了GP具有对抗卵巢功能损伤的潜力。2)为了探究GP用药是否影响果蝇的一般情况,在果蝇平台中,在喂食含有10mg/ml浓度的GP的食物后,我们统计了各组雌雄果蝇的寿命变化情况。结果表明GP可以有效延长雌性果蝇的整体寿命,表现为与对照组相比,各时间窗口用药组雌性果蝇在服用GP后最大寿命、平均寿命及中位寿命均得到了不同程度的延长,且25天开始用药直至死亡可以最大化延长果蝇的整体寿命,其最大寿命、平均寿命及中位寿命,分别延长了4.6%,6.7%,4.7%;健康寿命的延长表现为雌性果蝇在服用GP 30天后可以显著对抗应激刺激因素（高糖饮食刺激、饥饿饮食刺激）,相较于空白对照组,其生存率及寿命得到了提高。3)在雄性果蝇中,GP在羽化1天-25天时间段用药可最大程度延长其整体寿命,其最大寿命及平均寿命分别延长了3%和0.8%,中位寿命未有延长效应,且GP对于其健康寿命的延长效果也甚微。4)产卵数目是评估雌性果蝇卵巢功能最具代表性的指标。我们发现GP用药30天后可以明显提高雌性果蝇卵的孵化率;通过比较不同时间窗口用药方式发现,相较于空白对照组,各个时间段的用药方式均可以提高雌果蝇的产卵数,并且从羽化25天后直至死亡的用药时间段提高果蝇生命后半时期的产卵数目效果是最为明显的。结论绞股蓝皂苷可增加雌性果蝇产卵数目和孵化率,改善年龄累积性卵巢功能下降,并分别在羽化25天-死亡及羽化1天-25天时间段用药可最有效的延长雌性和雄性果蝇的整体寿命,且在寿命方面表现出性别差异性。目的本研究旨在利用小鼠平台探讨植物提取物绞股蓝皂苷对抗急性卵巢损伤的保护作用及其内在机制。方法1)6周健康的C57BL/6J小鼠随机分组,分为空白对照组NC,环磷酰胺组CTX,环磷酰胺+绞股蓝皂苷低剂量组G-L（100mg/kg）和环磷酰胺+绞股蓝皂苷高剂量组GH（400mg/kg）,每组10只,计划性给与每只小鼠药物处理后,通过计算各组小鼠的卵巢指数、对H＆E染色的卵巢组织切片进行卵巢形态学观察、卵泡计数以此评估各组小鼠卵巢储备功能。2)统计处死前的小鼠阴道分泌物涂片计算规律动情周期所占比例,检测小鼠眼球后血清中雌、孕激素浓度来评估环磷酰胺对小鼠卵巢内分泌功能的损害效应以及GP是否具有改善其对卵巢损伤的作用,同时通过计算小鼠6次繁育周期的平均产仔数和产仔次数进行了各组的生育力检测。3)为了探究GP是否影响化疗药物环磷酰胺对肿瘤细胞的杀伤效果,在荷瘤裸鼠模型上也同样进行了相应的研究。将小鼠随机分为空白对照组NC;环磷酰胺组CTX;环磷酰胺+绞股蓝皂苷组GP。通过每3天测量及统计各组小鼠的体重、肿瘤体积和称量处死后小鼠的肿瘤重量以评估药物对于各组小鼠的肿瘤生长的影响情况。4)通过连续14天小鼠阴道涂片统计各组小鼠的规律动情周期所占比例情况;通过镜下观察各组小鼠卵巢切片H＆E统计始基卵泡数量、各功能卵泡数量及闭锁卵泡数量,同时检测小鼠眼球后血清中AMH浓度来评估各组小鼠的卵巢内分泌及储备功能情况。5)通过γ-H2AX免疫组织化学染色、TUNEL荧光染色及Western Blotting检测凋亡（Bcl2,Bax以及c-PARP）及始基卵泡激活蛋白指标（p-PI3K,p-m TOR以及rp S6）等方法,进行了GP抵抗急性卵巢功能损伤的机制研究。结果1)在C57小鼠中,我们发现GP高、低剂量组均可以有效缓解CTX导致的卵巢储备、内分泌及生育功能受损,表现为卵巢指数升高,规律动情周期比例增加,始基卵泡及功能性卵泡增多、闭锁卵泡减少,血清雌孕激素含量显著升高,平均产仔数及平均产仔次数明显提高。其中GP高剂量保护效应要强于低剂量组,基于以上结果,在后续实验统一使用高剂量GP。2)为了探究GP是否会干扰CTX对肿瘤细胞的杀伤作用,在荷瘤小鼠模型中进一步进行了研究。连续腹腔注射GP 28天后发现,相较于CTX组,GP组小鼠肿瘤的体积、重量并未发现明显差异,且肿瘤体积及重量均显著小于NC组。发现GP并未影响CTX的抗肿瘤效果。3)GP组小鼠的卵巢功能较CTX组明显得到了提高,表现为规律的动情周期比例提高,始基卵泡数目显著增加,各阶段功能卵泡数目增多,闭锁卵泡减少及血清中AMH浓度升高。4)通过γ-H2AX组织化学染色、TUNEL荧光染色及Western Blotting检测Bcl2,c-PARP,Bax,p-PI3K及p-PI3K,p-m TOR,rp S6蛋白,发现GP可通过减少DNA损伤、细胞凋亡及始基卵泡激活有效改善CTX导致的荷瘤小鼠的急性卵巢功能受损。结论绞股蓝皂苷在不扰乱化疗药物疗效的同时可通过介导PI3K-AKT信号通路来抑制卵泡激活,并且还可通过减少DNA损伤及细胞凋亡抵抗CTX诱导的卵巢功能损伤。