益气化瘀通窍法对放射性视神经损伤的保护作用及机理研究

来源 :广州中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dreambox007
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目的:  1.通过观察大鼠视神经形态学改变及检测大鼠血液中内皮素-1(ET-1)和血管性血友病因子(vWF)浓度的变化,评估益气化瘀通窍药物对放射线照射引起的视神经和血管内皮细胞损伤的治疗作用。  2.通过照射前给予益气化瘀通窍药物,观察放射线照射后大鼠的视神经形态学改变及检测大鼠血液中ET-1和vWF浓度的变化,评估益气化瘀通窍药物预防放射线照射引起的视神经及血管内皮损伤的作用。  3.通过分析治疗前后放射性视神经病变(RION)患者视力、视野、视觉诱发电位及视盘周围视网膜神经纤维层厚度变化,评价益气化瘀通窍药物对 RION的治疗作用,探讨益气化瘀通窍法治疗RION的作用机理。  方法:  1.实验研究  (1)研究对象。预防用药组:于放射线照射前两周腹腔内注射黄芪注射液、盐酸川芎嗪注射液和醒脑静注射液,1次/日,共14天;空白组:不给予放射线照射,仅单纯给予等剂量的生理盐水;模型组:于照射完后注射生理盐水;  实验一组:于照射完后注射黄芪注射液和盐酸川芎嗪注射液;  实验二组:于照射完后注射黄芪注射液、盐酸川芎嗪注射液和醒脑静注射液;  均采用腹腔注射给药,1次/日,共14天,隔2周重复给药1疗程。  (2)研究内容。用酶联免疫吸附测定(ELISA)大鼠放射线照射前、照射完后1天、照射完后2周、4周及6周血液中ET-1和vWF含量。观察照射完后2周、4周和8周电镜下视神经纤维的超微结构以及照射完后8周视神经组织结构的改变。  2.临床研究。本临床试验采用自身前后对照的研究,收集RION患者11例共20眼,给予盐酸川芎嗪注射液80mg、醒脑静注射液20ml、黄芪注射液20ml静脉滴注,1次/日,14天/疗程,间隔2周后再次用药,共两个疗程,同时根据辨证分型给予益气活血中药汤剂。通过分析治疗前后 RION患者视力、视野、视觉诱发电位及视盘周围视网膜神经纤维层厚度,评价益气化瘀通窍法对RION患者的临床疗效。  结果:  1.不同时间点大鼠血液中ET-1的浓度变化情况:模型组照射前后各时间点比较,预防用药组照射前后各时间点比较,实验一组照射前后各时间点比较,实验二组照射前后各时间点比较,照射后2周各组之间比较,照射后4周各组之间比较,照射后6周各组之间比较,照射前与照射后1天比较,差异有统计学意义。  2.不同时间点大鼠血液中vWF的浓度变化情况:模型组照射前后各时间点比较,预防用药组照射前后各时间点比较,实验一组照射前后各时间点比较,实验二组照射前后各时间点比较,照射后2周各组之间比较,照射后4周各组之间比较,照射后6周各组之间比较,照射前与照射后1天比较,差异有统计学意义;  3.RION视神经超微结构改变  ①空白组:轴索的脱髓鞘率为:1.35±0.79%。  ②模型组:放射2周后轴索的脱髓鞘率为:14.44±2.32%,放射4周后轴索的脱髓鞘率为:21.47±2.13%。  ③预防用药组:放射2周后轴索的脱髓鞘率为:14.94±2.49%,放射4周后轴索的脱髓鞘率为:20.76±3.40%,放射8周后轴索的脱髓鞘率为:32.21±5.75%。  ④实验一组:放射2周后轴索的脱髓鞘率为:15.37±2.39%,放射4周后轴索的脱髓鞘率为:21.69±2.36%,放射8周后轴索的脱髓鞘率为:26.25±6.62%。  ⑤实验二组:放射2周后轴索的脱髓鞘率为8.58±1.48%,放射4周后轴索的脱髓鞘率为:13.17±2.97%,放射8周后轴索的脱髓鞘率为:17.31±1.68。  4.8周后RION视神经显微结构改变  ①空白组:神经纤维束呈柱形均匀排列,染色均匀,胶质细胞散在分布,无组织、细胞水肿及细胞核固缩。  ②模型组:神经纤维束肿胀,排列紊乱,神经纤维间空泡化明显,神经胶质细胞散在分布,细胞水肿,部分细胞核固缩。  ③预防用药组:神经纤维束肿胀,排列紊乱,神经纤维见空泡化明显,神经胶质细胞散在分布,细胞水肿,部分细胞核固缩。  ④实验一组:神经纤维束肿胀,排列紊乱,神经纤维间空泡化,神经胶质细胞散在分布,细胞水肿,部分细胞核固缩。  ⑤实验二组:神经纤维束肿胀,排列稍紊乱,少量神经纤维间空泡化,神经胶质细胞散在分布,细胞水肿,部分细胞核固缩。  5.临床研究中,在20眼中视力由手动提高到指数的有2眼,由指数提高到0.1以下的有3眼,由0.1以下提高至0.1的有2眼,提高一行的有2眼,提高两行的有1眼。治疗前后视野检查比较,差异有统计学意义,说明视野光敏感度明显增高。治疗前后P-VEP PRR100波振幅比较,差异有统计学意义,说明P-VEP P100波振幅明显升高;P-VEP P100波潜伏期比较,差异无统计学意义,说明治疗前后P-VEP P100波潜伏期改变不明显;治疗前后F-VEP P2波振幅比较,差异无统计学意义;说明F-VEP P2波振幅无明显改变;治疗前后F-VEP P2波潜伏期比较, 差异无统计学意义;说明F-VEP P2波潜伏期无明显改变;治疗前后视盘周围视网膜神经纤维层厚度比较,差异无统计学意义,说明治疗前后视盘周围视网膜神经纤维层厚度无明显变化。  结论:  1.黄芪注射液和盐酸川芎嗪注射液腹腔注射能降低RION模型鼠血液中的ET-1和vWF的含量,推测其具有减轻放射线引起的血管内皮细胞损伤作用,并能改善局部微循环;黄芪注射液、盐酸川芎嗪注射液联合醒脑静注射液腹腔注射能降低 RION模型鼠血液中的ET-1和vWF的含量,推测其具有减轻放射线引起的血管内皮细胞损伤作用,并能改善局部微循环,其疗效优于黄芪注射液和盐酸川芎嗪注射液联合应用;  2.黄芪注射液、盐酸川芎嗪注射液联合醒脑静注射液放射线照射前预防性腹腔注射能降低RION模型鼠血液中的ET-1和vWF的含量,推测其具有减轻放射线照射引起的血管内皮细胞损伤作用,同时还能改善了局部微循环;但效果不如三药联合照射后给药组和黄芪注射液联合盐酸川芎嗪注射液照射后给药组。  3.黄芪注射液、盐酸川芎嗪注射液联合醒脑静注射液照射后腹腔注射能明显改善放射线照射引起的早期视神经损伤。  4.黄芪注射液联合盐酸川芎嗪注射液腹腔注射改善放射线照射引起的早期视神经损伤作用不明显。  5.黄芪注射液、盐酸川芎嗪注射液联合醒脑静注射液在放射线照射前预防性腹腔注射预防放射线照射引起的早期视神经损伤作用不明显。  6.益气通窍化瘀法能有效提高辨证属气虚血瘀、玄府闭塞,视力受损较轻的RION患者视网膜光敏度和视觉诱发电位振幅。对辨证属气虚血瘀、玄府闭塞,视力受损较重的RION患者视觉诱发电位的改变不明显。
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