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平菇(Pleurotus ostreatus)是人工广泛栽培的食用菌之一,年产量约占食用菌总产量的60%。衰老伴随许多疾病的发生,缺乏有效的治疗手段,因此寻找有效抗衰老的天然物质至关重要。本试验采用水提醇沉、去蛋白、葡聚糖凝胶层析柱、透析等方法分离纯化获得平菇子实体多糖(Polysaccharides of Pleurotus ostreatus,PP),对D-半乳糖(D-galactose,D-gal)诱导的衰老小鼠脑、肝进行了体内抗氧化、抗炎症以及抗凋亡分析,对脑、肝和结肠进行了病理学H&E切片观察,通过气相色谱(Gas chromatogram,GC)、傅里叶红外光谱(Fourier-transform infrared,FT-IR)和核磁共振(Nuclear magnetic resonance,NMR)对平菇子实体多糖进行了结构分析。主要试验结果如下:(1)PP体内抗氧化分析:以超氧化物歧化酶(Superoxide dlsmutase,SOD)、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量为脑和肝组织抗氧化指标,结果显示经过PP干预的D-半乳糖诱导的小鼠脑和肝组织的SOD活性与D-半乳糖诱导的小鼠相比分别增加了25.8 U/mg prot和36.23 U/mg prot,MDA含量分别减少了1.78 nmol/mg prot和2.71nmol/mg prot,表明PP在一定程度上提高D-半乳糖诱导的衰老小鼠的脑和肝组织抗氧化能力。(2)PP体内的抗炎症分析:以白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)因子为炎症指标,脑和肝组织的mRNA实时荧光定量PCR检测结果显示,PP能够降低D-半乳糖诱导的衰老小鼠中IL-1β、IL-6和TNF-αmRNA的表达量,说明PP能够增强D-半乳糖诱导衰老小鼠脑和肝组织的抗炎症作用。(3)PP抗凋亡分析:利用凋亡蛋白Bax,Caspase-3和抗凋亡蛋白Bcl-2抗体,对脑组织进行了Western和免疫荧光切片观察,对肝组织进行了免疫荧光切片观察。发现PP能降低脑组织中凋亡蛋白Bax,Caspase-3的表达量,增加抗凋亡蛋白Bcl-2表达量;降低肝组织凋亡蛋白Bax的表达量,增加肝组织抗凋亡蛋白Bcl-2表达量,证明PP具有增强衰老小鼠脑和肝组织的抗凋亡能力。(4)病理学切片分析:脑、肝和结肠组织的H&E病理学切片观察结果表明,D-半乳糖诱导的衰老小鼠脑、肝和结肠出现了不同程度的损伤,海马组织轮廓差异不明显,肝组织中细胞变性,肝细胞胞浆疏松,肝细胞水肿较严重,结肠组织肠道固有层明显变短,黏膜肌层弥散,经PP干预后,上述表现症状均有所缓解,表明PP对D-半乳糖诱导的衰老小鼠的脑、肝和结肠损伤具有一定修复作用。(5)PP的结构分析:气相色谱图结果表明,PP由甘露糖(mannose)、核糖(ribose)、葡萄糖醛酸(glccuronic acid)、葡萄糖(glucose)、半乳糖(galactose)、阿拉伯糖(Arabinose)和岩藻糖(fucose)组成,其质量比为15.78%,0.91%,1.10%,57.62%,23.77%,0.14%和0.67%。红外光谱分析了PP主要由α和β糖苷键构成。核磁共振结果检测,氢谱在5.44,5.41,4.94和4.87 ppm分别出现异头质子,说明PP可能主要由4种单糖组成,为甘露糖(mannose),葡萄糖(glucose)、半乳糖(galactose)和阿拉伯糖(Arabinose),碳谱在103.70,102.64,99.31和93.55 ppm分别出现4个异头碳,可能代表了β-半乳糖,α-甘露糖,α-阿拉伯糖和α-葡萄糖。综上结果表明,PP对D-半乳糖诱导的衰老小鼠脑和肝组织具有较强的抗氧化,抗炎症,抗凋亡活性,对D-半乳糖诱导的衰老小鼠组织损伤有一定修复作用,为机体抗衰老天然药物的筛选提供参考。