目的本研究以腹腔注射氢化可的松制作大鼠肾阳虚模型,将“阴中求阳”代表方剂金匮肾气丸进行原方与拆方的配伍研究,分为补阳组、补阴组、阴阳双补组,通过对下丘脑CRH阳性细胞含量进行药效学的研究;并对各拆方组煎剂中有效成分的含量变化进行比较,及对血清中各拆方组有效成分的变化进行比较,以进一步探讨“阴中求阳”的配伍机理及物质基础。本研究将为中医阴阳学说实质的研究,阴阳互根物质基础及“阴中求阳”配伍机理的研究提供科学资料。方法将肾气丸拆方分为补阳组、补阴组、阴阳双补组。补阳1组由附子、桂枝组成;补阳2组由附子、桂枝+茯苓、泽泻、牡丹皮组成;补阴1组由生地黄、山茱萸、山药组成;补阴2组由生地黄、山茱萸、山药+茯苓、泽泻、牡丹皮组成;阴阳双补1组由附子、桂枝+生地黄、山茱萸、山药组成;阴阳双补2组由附子、桂枝+生地黄、山茱萸、山药+茯苓、泽泻、丹皮组成,即肾气丸全方组。按照上述肾气丸拆方分组,检测含有附子拆方组水煎液中乌头碱、次乌头碱的含量,分析不同配伍对其含量的影响,初步探讨肾气丸“阴中求阳”的物质基础。将SD雄性大鼠,随机分为正常组、模型组、拆方肾气丸组(对应上述肾气丸分组),除正常组外,其余大鼠均每日大腿内侧肌肉注射氢化可的松25mg/kg,连续12天,同时开始灌胃给药,正常组、模型组给予等体积生理盐水。连续灌胃给药20天,于第21天上午8时麻醉大鼠,心脏取血5ml,静置,离心取上层血清,检测含有桂枝,丹皮的各拆方组中桂皮醛、丹皮酚的含量;以以4%多聚甲醛进行主动脉灌流,取脑组织做冠状冰冻切片,HE染色观察下丘脑病理形态改变,免疫组化检测下丘脑CRH(促肾上腺激素释放激素)的含量。结果通过对各含有附子的肾气丸拆方组水煎液中乌头碱、次乌头碱的含量进行测定各组水煎液中均未能检测出乌头碱的含量。而阴阳双补组-2、阴阳双补组-1水煎液中次乌头碱含量均低于补阳组-1、补阳组-2,阴阳双补组-2中次乌头碱含量低于阴阳双补组-1,且都具有统计学意义。通过对HE染色观察下丘脑病理形态改变,结果显示对照组未见明显的病理改变;模型组见小软化灶;双补1组有1例可见小坏死灶;其余各组均未见明显病理改变。通过对下丘脑CRH含量的检测,结果显示各治疗组与模型组相比,CRH阳性细胞面积百分比双补一组有增加(P<0.05)、双补二组具有显著增加(P<0.01);模型组与对照组相比,CRH阳性细胞面积百分比明显降低(P<0.01);双补二组和其他治疗组比较,CRH阳性细胞面积百分比明显增加(P<0.01)结论肾气丸的“阴中求阳”配伍,在大量滋阴药中少佐温阳药以达微微生火、少火生气的目的,而在药理实验中还能够减少附子中的毒性成分次乌头碱在水煎液中的含量,起到降低毒性的作用。CRF作为下丘脑激素在调节下丘脑一垂体一肾上腺轴(HPA轴)的功能中发挥着重要作用。本研究提示,各治疗组与模型组相比,CRH阳性细胞面积百分比双补一组有差异(P<0.05)、双补二组具有显著差异(P<0.01)、其他治疗组虽有一定量的增加,但是没有统计学意义,而双补一组(附子、桂枝+干地黄、山茱萸、山药);双补二组(附子、桂枝+干地黄、山茱萸、山药+茯苓、泽泻、丹皮)即肾气丸全方组。此两组正为阴中求阳配伍的体现,肾气丸“阴中求阳”的配伍可能是通过调节下丘脑的CRH分泌来调节HPA轴功能,从而达到温补肾阳的功效。