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巨噬细胞是肿瘤微环境中主要的细胞成分。肿瘤微环境中的巨噬细胞在微环境中细胞因子、分泌蛋白等影响下,由可以杀伤和吞噬肿瘤的M1型巨噬细胞,转化为促肿瘤的M2型巨噬细胞。通常认为,M1型巨噬细胞参与炎症反应和抗肿瘤免疫,而M2型巨噬细胞发挥抗炎和促肿瘤的作用。巨噬细胞极性的变化,受到微环境中细胞因子、趋化因子和细胞外基质的调控。本研究主要集中于肿瘤细胞分泌的细胞因子和生物小分子,探索它们在肿瘤微环境中对巨噬细胞的极化作用。首先构建了Src蛋白高表达的NIH3T3/Src细胞系,发现NIH3T3/Src细胞的培养上清可以诱导ANA-1细胞向M2型巨噬细胞极化。为了明确NIH3T3/Src细胞培养上清中诱导巨噬细胞极化的具体成分,利用细胞因子芯片检测了NIH3T3/Src田胞分泌的细胞因子,发现与对照组NIH3T3/p3.1细胞培养上清相比,IL-6、MCP-1、sTNFR, VEGF、KC、GM-CSF和axl等因子在NIH3T3/Src细胞培养上清中分泌水平升高。通过NF-κB的特异性抑制剂PDTC和JAK-STAT的特异性抑制剂AG490抑制NIH3T3/Src细胞NF-κB和JAK-STAT信号通路后,ELISA检测发现上清中IL-6和MCP-1等细胞因子受到不同程度的抑制。同时NIH3T3/Src细胞培养上清诱导巨噬细胞极化的能力明显降低。这些结果提示细胞因子IL-6在诱导巨噬细胞极化过程中起着关键作用。此外,在NIH3T3/Src细胞培养上清中还检测到乳酸(Lactic acid)分泌升高。当用α-氰基-4-羟基肉桂酸CHC抑制巨噬细胞表面的单羧酸转运蛋白MCT,使巨噬细胞对培养基中的乳酸摄入减少后,NIH3T3/Src细胞培养上清诱导巨噬细胞极化的能力降低。提示乳酸在诱导巨噬细胞极化中发挥重要作用。随着APCMin/+小鼠结直肠肿瘤的进展,小鼠结直肠组织间隙液中IL-6、IL-9和1L-10等因子分泌量维持高水平。在IL-6特异性敲除的小鼠IL-6tmlKopf中,当用AOM-DSS化学诱导小鼠发生结直肠肿瘤,与对照组AOM-DSS小鼠相比,IL-6tmlKopf-AOM-DSS小鼠的成瘤性明显受到抑制,提示IL-6在肿瘤形成过程中起重要作用。综上所述,IL-6、乳酸等因子在NIH3T3/Src田胞培养上清诱导巨噬细胞极化过程中起着重要作用。我们目前的研究提示了一个诱导巨噬细胞极化的可能的机制,同时也提示一个潜在的抑制巨噬细胞极化的途径,或许能成为一种新的有前途的癌症治疗方式。