穴位埋药线对脑缺血再灌注大鼠皮质区促血管生成因子表达的影响

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目的:应用穴位埋线疗法结合现代药理学研究制备胶原川芎嗪缓释剂(药线),观察其在百会、大椎穴位埋药线对局灶性脑缺血再灌注大鼠缺血侧皮质区脑组织促血管生成因子VEGF mRNA及Ang-1 mRNA表达的影响。   方法:选用健康SD大鼠96只,体重200±20g,随机分为6组:正常对照组6只,假手术对照组18只,模型对照组18只,穴位注射对照组18只,尾静脉注射对照组18只,穴位埋药线治疗组18只。后五组均随机再分为三个组,分别为1、3、5天组,每组6只动物。采用改良线栓法复制大鼠脑缺血再灌注模型(MCAO),选取穴位百会、大椎进行穴位埋药线处理。所有动物在最后观察日24h后采用颈椎脱臼断头取脑方式取缺血侧皮质区视交叉前后脑组织,-80℃冰箱冷冻保存待检。采用逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测标本中VEGF mRNA及Ang-1mRNA的表达,紫外灯下拍照,运用Gel-pro32分析软件对所摄图像中目标条带进行密度分析。   结果:RT-PCR结果显示:   1.模型对照1天组与正常对照组、假手术对照组同时相比较,大鼠缺血侧皮质区脑组织VEGF mRNA表达明显升高,有显著性差异(P<0.05),但之后则逐渐下降,后两组同时相比较差异无显著性意义(P>0.05);其余各组与模型对照组同时相比较,缺血侧皮质区脑组织VEGF mRNA的表达均有明显升高,有显著性差异(P<0.05),其中治疗组的效果明显优于穴位注射对照组和尾静脉注射对照组(P值均<0.05)。   2.模型对照1天组与正常对照组、假手术对照组同时相比较,缺血侧皮质区脑组织Ang-1 mRNA表达有所升高,但差异无显著性意义(P>0.05),但其表达随时间延长而发生明显变化,1天后表达继续升高,5d组达到高峰,3天、5天组同时相比较均有显著性差异(P<0.05);其余各组与模型对照组同时相比较,缺血侧皮质区脑组织Ang-1 mRNA的表达均有明显升高,有显著性差异(P<0.05),其中治疗组的效果明显优于穴位注射对照组和尾静脉注射对照组(P值均<0.05)。   结论:缺血性脑卒中后,缺血侧梗死灶脑组织很快即发生不可逆性坏死,而缺血梗死灶周围区域脑组织则处于凋亡阶段,这一阶段的多数脑细胞及神经细胞在及时恢复血液供应后能够可逆性的保存。脑卒中发生后,脑组织自身即可应激性的合成及分泌Ang-1及VEGF,这是自身保护性反应,并不能有效形成新生血管以恢复供血,随着缺血的加重,缺血梗死灶周围区域脑组织也将发生不可逆的变性坏死。穴位埋药线可能通过上调缺血性脑卒中皮质区脑组织VEGF mRNA及Ang-1mRNA表达水平,促进新生血管的形成及稳定,及时恢复缺血区血液供应,减少缺血再灌注损伤,发挥脑保护作用,研究结果显示其作用优于穴位注射和尾静脉注射两种疗法。  
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