【摘 要】
：
目的:通过建立幼龄寒性哮喘豚鼠模型,观察息风定喘方对寒性哮喘豚鼠肺组织中嗜酸性粒细胞（EOS）凋亡及相关调控基因Fas,Fas-L,Bax及Bcl-2表达的影响,从细胞凋亡角度探讨息风定喘方减轻哮喘气道炎症作用机理。方法:幼龄雄性豚鼠72只,采用随机数字表法分为正常对照组（简称正常组）、寒哮模型组（简称寒哮组）、息风定喘方低、中、高三个剂量组及地塞米松组,每组12只。造模各组予腹腔注射10%卵清蛋
论文部分内容阅读
目的:通过建立幼龄寒性哮喘豚鼠模型,观察息风定喘方对寒性哮喘豚鼠肺组织中嗜酸性粒细胞（EOS）凋亡及相关调控基因Fas,Fas-L,Bax及Bcl-2表达的影响,从细胞凋亡角度探讨息风定喘方减轻哮喘气道炎症作用机理。方法:幼龄雄性豚鼠72只,采用随机数字表法分为正常对照组（简称正常组）、寒哮模型组（简称寒哮组）、息风定喘方低、中、高三个剂量组及地塞米松组,每组12只。造模各组予腹腔注射10%卵清蛋白混合液致敏后,予1%卵清蛋白溶液雾化激发联合寒冷刺激法复制寒性哮喘豚鼠模型;正常组以0.9%生理盐水代替。造模成功后,息风定喘方各剂量组及地塞米松组每天均按换算豚鼠等效剂量给药一次,正常组与寒哮组给予等量生理盐水,连续21天。实验过程中记录豚鼠一般情况,实验结束后取材,检测各组豚鼠外周血及肺泡灌洗液（BALF）白细胞（WBC）、EOS计数,并比较比值;观察各组豚鼠肺组织病理改变;TUNEL法检测细胞凋亡指数;免疫组化（IHC-P）、免疫印迹法（Western Blot,WB）法进行肺组织Fas,Fas-L,Bax及Bcl-2的检测;RT-PCR进行肺组织Fas,Fas-L,Bax及Bcl-2 m RNA的检测。结果:1.一般情况:各组豚鼠在激发阶段,逐渐出现搔鼻、喷嚏,频繁抓耳挠腮等典型哮喘症状。药物干预后,豚鼠喷嚏及咳嗽症状改善,食量增加、体重增长速度增快,被毛光泽恢复,其中息风定喘方高剂量组豚鼠症状改善情况优于息风定喘方中、低剂量组。2.各组豚鼠外周血WBC、EOS计数及EOS比值:与正常组比较,寒哮组各项指标均显著上升（P＜0.01）;与寒哮组比较,息风定喘方各剂量组及地塞米松组各项指标均下降;与地塞米松组比较,息风定喘方高剂量组外周血WBC及EOS计数与之接近,无统计学意义。3.各组豚鼠BALF中WBC、EOS计数及EOS比值:与正常组比较,寒哮组BALF中各项指标均显著增加（P＜0.01）;与寒哮组比较,息风定喘方各剂量组及地塞米松组各项指标均下降;与地塞米松组比较,息风定喘方高剂量组肺BALF中WBC及EOS计数与之接近,无统计学意义。4.各组豚鼠肺组织病理改变:HE染色发现与正常组对比寒哮组豚鼠支气管收缩明显,黏膜增厚,管腔变窄,结构紊乱,可见大量EOS及炎性细胞浸润。息风定喘方高剂量组肺组织形态改变优于低、中剂量组,其管壁结构、肺泡腔基本恢复正常,EOS浸润明显减少。息风定喘方低、中剂量组仍可见部分炎性细胞浸润,管壁结构较紊乱。地塞米松组豚鼠肺部组织形态恢复与息风定喘方高剂量组形态相似,管壁结构基本恢复正常,未见明显炎性细胞聚集。5.各组豚鼠肺组织EOS凋亡情况:与正常组比较,寒哮组凋亡指数明显下降（P＜0.01）;与寒哮组比较,息风定喘方各剂量组及地塞米松组凋亡指数均增高（P＜0.05）,息风定喘方高剂量组凋亡指数最高,中、低剂量组依次次之;息风定喘方中、高剂量组细胞凋亡指数与地塞米松组比较,无统计学意义。6.各组豚鼠肺组织Fas、Fas-L、Bax及Bcl-2蛋白表达比较:IHC-P及WB结果均显示与正常组比较,寒哮组豚鼠肺组织Fas、Fas-L、Bax蛋白表达明显减少（P＜0.01）,Bcl-2蛋白表达显著增加（P＜0.01）;息风定喘方各剂量组、地塞米松组均较寒哮组肺组织Fas、Fas-L、Bax蛋白表达增加,Bcl-2蛋白表达减少;息风定喘方高剂量组与地塞米松组蛋白表达相接近,无统计学意义。7.各组豚鼠肺组织Fas、Fas-L、Bax及Bcl-2 m RNA表达:RT-PCR结果显示与正常组比较,寒哮组Fas、Fas-L及Bax m RNA表达下降（P＜0.01）,Bcl-2m RNA表达增多（P＜0.01）;与寒哮组比较,息风定喘方各剂量组及地塞米松组Fas、Fas-L及Bax m RNA表达均上升,Bcl-2 m RNA表达均下降;息风定喘方中、高剂量组与地塞米松组比较,无统计学意义。结论:1.息风定喘方可以减少寒哮豚鼠外周血及肺泡灌洗液中白细胞及嗜酸性粒细胞计数,减轻炎性细胞浸润。2.息风定喘方可以诱导寒哮豚鼠肺组织EOS凋亡。3.息风定喘方可通过提高寒哮豚鼠肺组织中Fas,Fas-L,Bax蛋白与m RNA表达,下调Bcl-2蛋白与m RNA表达,诱导肺组织EOS凋亡,减轻炎症反应,达到平喘的目的。
其他文献
目的:本课题主要观察针刀松解联合艾灸治疗风寒湿痹型腰背肌筋膜炎（lumbar back myofascitis,LBM）的临床疗效,以改善或缓解腰背部肌筋膜的疼痛症状,为风寒湿痹型LBM的临床治疗提供更加确切的方案。方法:纳入2020年7月至2021年9月于安徽中医药大学第二附属医院骨伤一科就诊的62例符合风寒湿痹型腰背肌筋膜炎患者,采用随机分组原则,将患者随机分为对照组（针刺联合艾灸组）与观察组
目的探讨芪白平肺胶囊通过线粒体凋亡通路对低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞凋亡的影响,为芪白平肺胶囊的临床应用提供依据。方法1.将20只SPF级SD大鼠随机分成空白血清组以及含药血清组,每组各10只。含药血清组予芪白平肺胶囊溶液灌胃,空白血清组予等量生理盐水灌胃,末次给药后经腹主动脉取血,制备空白血清及芪白平肺胶囊含药血清。2.提取原代大鼠PASMCs并进行荧光鉴定。用低氧培养箱（3%O2,5%CO2
1.目的（1）通过金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus,SA）生物被膜（Biofilm,BF）的微生物实验,给予复方黄柏液涂剂干预,观察复方黄柏液涂剂对SA及其生物被膜的抑制作用。（2）建立SA生物被膜感染创面的大鼠模型,给予复方黄柏液涂剂干预,观察其对生物被膜感染创面控制、肉芽生长和创面愈合的影响。2.方法2.1复方黄柏液涂剂对金葡菌生物被膜抑制作用的体外实验通过建立体外S
目的:通过建立肛瘘术后慢性难愈合创面大鼠模型,观察白竭散对肛瘘术后慢性难愈合创面大鼠模型创面的修复作用。通过动态检测切口组织内部分炎症因子、生长因子以及MMP-9、TIMP-1的相对表达水平,初步探讨白竭散加速肛瘘术后慢性难愈合创面的愈合机制,并为临床上运用白竭散治疗肛瘘术后慢性难愈合创面提供可靠依据。方法:将60只SD雄性大鼠（SPF级）先建立急性开放性皮肤缺损创面,随机抽取其中15只大鼠作为急
目的收集整理名老中医治疗肺癌的医案,总结患者的证素分布特点,探索名老中医治疗肺癌的药物配伍规律。通过对核心组方进行核心靶点和功能通路的筛选,挖掘中医药治疗肺癌的潜在治疗靶点。通过细胞实验验证芪玉三龙方含药血清通过上述核心靶点影响肺癌A549细胞,继而为芪玉三龙方后续的抗肺癌机制提供理论依据。方法1.从知网、维普、万方数据库中检索有关名老中医治疗肺癌的文献,筛选出符合纳入标准的医案,并对医案中的证素
目的:通过观察滋阴潜阳方对自发性高血压大鼠肾脏血管紧张素Ⅱ/Toll样受体4/核转录因子-κB信号通路的调控作用,探讨其改善SHR肾脏损害的机制。方法:12周龄,雄性,SHR 40只,体质量（230±20 g）,按照随机数表法将40只SHR分为模型组(予以0.9%Na Cl溶液10 ml·kg-1·d-1灌胃),依那普利组(予以依那普利1.05mg·kg-1·d-1灌胃),滋阴潜阳方高剂量组(予以
研究目的:基于Wnt/β-catenin信号通路探讨复方补肾活血颗粒对骨髓间充质干细胞（BMSCs）增殖和成骨分化的干预作用及其调控机制,为复方补肾活血颗粒的临床应用提供实验依据。研究方法:1、制备空白血清和复方补肾活血颗粒含药血清,用不同浓度（2%、5%、8%）空白血清和含药血清对BMSCs进行体外培养,用CCK-8检测其增殖情况。2、用空白血清、不同浓度复方补肾活血颗粒含药血清及成骨分化诱导液
目的以滑膜炎症为研究方向,以改良Hulth法为造模方法建立膝骨关节炎兔模型,以理筋正骨手法作为治疗手段,从滑膜炎症角度探讨理筋正骨手法治疗膝骨性关节炎的作用机制。方法从安徽医科大学实验动物饲养中心购买40只合格的SPF级新西兰大白兔（6月龄,雄性,2～2.5kg）,按照完全随机原则分为四组:正常对照（Normal control,NC）组10只,手术模型（surgical model,SM）组10
目的:基于电针联合跑台训练对局灶性脑缺血（focal cerebral ischemia,FCI）模型大鼠高迁移率族蛋白Bl（high mobility group box1,HMGB1）/Toll样受体4（toll-like receptor-4,TLR4）/核因子-κB（nuclear factor kappa B,NF-κB）信号通路的影响,探索电针联合跑台训练对脑缺血后炎症反应的调节机制,
1目的观察复发性流产患者中血清VEGF、SOD、GSH-Px、Hcy的表达,通过对复发流产患者进行中药干预,探索补肾安胎冲剂对VEGF、SOD、GSH-Px、Hcy表达的影响及其是否能够调节氧化应激状态,进而改善RSA血管生成障碍的作用与机制,为临床治疗提供新思路和新途径,丰富“胞脉系于肾”的科学内涵。2方法由2020年5月至2021年5月,通过临床采集就诊在安徽中医药大学第一附属医院妇科、生殖中