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紫杉醇是疗效确切的抗癌新药,但其天然来源——红豆杉物种稀少,濒临灭绝。本研究通过对南方红豆杉进行组织培养,优化各种培养条件,进一步提高紫杉醇含量,为保护红豆杉资源和扩大紫杉醇的临床应用提供基础性资料。本试验取得了以下结果:1.南方红豆杉外植体最佳消毒方案:在单因素预试验的基础上,筛选出用于南方红豆杉组织培养的最佳外植体为当年生嫩茎,并首次采用正交设计,确定出最适消毒方案为先使用70%的酒精浸泡30s,再使用0.2%的升汞浸泡8min。2.南方红豆杉愈伤组织诱导培养基的优化:以MS培养基为基本培养基,在单因素预试验的基础上,对三种激素的浓度进行正交设计,确定出用于诱导南方红豆杉愈伤组织的最适激素配比为,NAA浓度1.5mg/L,6-BA浓度0.1mg/L,2,4-D浓度0.25mg/L。3.南方红豆杉愈伤组织生产培养基的优化:以B5培养基为基本培养基,在单因素预试验的基础上,对三种生长调节物质的浓度进行正交设计,确定出适于南方红豆杉愈伤组织传代培养的生产培养基生长调节物质添加方案为,NAA浓度0.5mg/L,6-BA浓度0.5mg/L,水解酪蛋白浓度1.0g/L。4.南方红豆杉愈伤组织抗褐变剂筛选:根据多酚氧化酶(PPO)在南方红豆杉愈伤组织褐变中的核心作用,选择出可以从不同方面对PPO进行抑制的三种抗褐变物质,在单因素预试验的基础上,首次对抗褐变剂进行组合使用,采取正交设计确定出抗褐变剂添加方案为PA浓度100mg/L,AC浓度500mg/L,水解酪蛋白浓度6.0g/L。5.南方红豆杉愈伤组织传代培养:在优化过的生产培养基中添加抗褐变剂,对愈伤组织进行传代培养。通过绘制生长曲线,确定了南方红豆杉愈伤组织的最佳采收时间为32d。对采收的南方红豆杉愈伤组织中的紫杉醇进行提取,使用紫外分光光度法测定紫杉醇含量,证明南方红豆杉愈伤组织的紫杉醇含量比原植物中高4.73倍。