随着现代经济的迅速发展,现代养殖业近年来也迅速发展,由此引起的抗生素的滥用导致的大量药物残留已经成为威胁人类健康的严重经济社会问题。硝基呋喃类和氟喹诺酮类药物是人工合成的广谱抗生素,因为其价格低廉,效果良好,被广泛应用于畜禽和水产养殖业。但是这些药物的滥用也不可避免的导致大量残留,对人体产生诸如致癌,致突变等毒副作用,引起细菌耐药性的增加,还通过环境和食物链的作用间接对人体健康造成潜在危害。现在很多国家已经规定了食品中硝基呋喃类和氟喹诺酮类药物残留的最高检出上限。为保障人民身体健康和国家进出口经济利益,建立方便快速可靠的硝基呋喃类和氟喹诺酮类药物的残留检测方法是非常有必要的。很多国家已经为此而建立了一些药物残留的监测方法。包括传统的仪器法,微生物检测法和新兴的酶联免疫检测法（ELISA）。传统检测药物残留的仪器分析方法包括HPLC、LC-UV、LC-Ms和LC-MS-MS等。这些方法优点是准确、稳定、特异性好,可以作为标准方法,但仪器设备昂贵,笨重,需要大量的溶剂,对操作人员要求很高,样品前处理复杂、费时、费力、不易普及,不适合对大规模的样品进行即时检测。微生物检测法虽然可以进行大量样品的即时检测,但是特异性差,不能进行准确的定性定量分析。酶联免疫检测法（ELISA）克服了以上方法的缺点,是一种快速、灵敏、方便的检测方法,可以用于大量样品的即时检测,有着广阔的发展前景。而结合了化学发光分析的酶联免疫检测法（CL-ELISA）,由于有着更高的灵敏度,更宽的线性范围,成为了酶联免疫检测法的发展趋势。本论文旨在建立呋喃唑酮,呋喃妥因和加替沙星的化学发光酶联免疫吸附检测法（CL-ELISA）。对于呋喃唑酮,根据其结构特点,从其代谢产物（AOZ）出发制备免疫原和包被抗原。利用混合酸酐法合成的免疫原,先将AOZ先与CBA偶连,衍生为CPAOZ,然后利用混合酸酐法与活化的牛血清白蛋白（cBSA）偶联合成了免疫原。将此免疫原免疫新西兰大白兔制得呋喃唑酮的多克隆抗体。合成免疫原的同时,也利用戊二醛法将AOZ与卵清蛋白（OVA）偶联合成了包被抗原。对呋喃唑酮,其抗体用间接竞争化学发光ELISA法检测结果如下:IC₅₀是0.8ng/mL,检测限为0.01ng/mL。该抗体除对CPAOZ的交叉反应率较高外,和其他药物的交叉率均很小。而传统的比色ELISA法得到的检测下限为0.2ng/ml,IC₅₀是2.9ng/mL,与传统的比色ELISA法相比,化学发光ELISA法有着更好的灵敏度和检测下限。用此抗体检测呋喃唑酮在养殖用水中的添加回收率,批间回收率范围在83-103%之间,批内回收率范围在78-113%之间。批间变异系数在5-27%之间,批内变异系数在4-18%之间。对于呋喃妥因,其免疫原和包被抗原的合成方法与呋喃唑酮类似。也是从代谢产物AHD出发,衍生为CPAHD后,用混合酸酐法与活化的牛血清白蛋白（cBSA）偶联合成了免疫原,免疫新西兰大白兔制得多克隆抗体。用戊二醛法将AHD与卵清蛋白（OVA）偶联合成包被抗原。对呋喃妥因,其抗体用间接竞争化学发光ELISA法检测结果如下:IC₅₀为0.85ng/mL,检测限为0.01ng/mL,而传统的比色ELISA法得到的检测下限为0.1ng/ml,IC₅₀是3.2ng/ml。该抗体除对CPAHD的交叉反应比较明显外,和其他药物的交叉率均很小。用此抗体检测呋喃妥因在养殖用水中的添加回收率,批间回收率范围在93.2-110%之间,批内回收率范围在87.6-113.5%之间。批间变异系数在6-19%之间,批内变异系数在3-16%之间。对于加替沙星,其免疫原和包被抗原由EDC法制备。其抗体用间接竞争化学发光ELISA法检测结果如下:IC₅₀为0.4ng/mL,检测限为0.01ng/mL,而传统的比色ELISA法得到的检测下限为0.05ng/ml,IC₅₀是2.6ng/mL。该抗体与其他氟喹诺酮类药物的交叉反应均很小。用此抗体检测加替沙星在牛奶样品中的添加回收率,批间回收率范围在93-103%之间,批内回收率范围在89-105%之间。批间变异系数在5-16%之间,批内变异系数在4-10%之间。通过对硝基呋喃类和氟喹诺酮类药物的研究,我们成功地制备了呋喃唑酮,呋喃妥因和加替沙星的免疫原及包被抗原,并通过动物免疫制备了相应的多克隆抗体。基于这些抗体,我们建立了呋喃唑酮,呋喃妥因和加替沙星的化学发光美联免疫吸附检测法,并且验证了与传统的比色ELISA法相比,化学发光ELISA法有着更好的灵敏度和检测下限。为最终开发商品化的检测试剂盒打下了良好的基础,并为其他药物抗体的制备和检测试剂盒的开发开辟了道路。