20世纪70年代以来，恶性肿瘤的发病率及死亡率一直呈上升趋势，在我国农村与城市，已成为居民死亡首要原因。目前治疗恶性肿瘤的方法主要有手术治疗、化疗和放疗，随着生物技术的不断发展，免疫治疗已成为研究的热点。本研究拟构建热休克蛋白融合蛋白疫苗，并进一步研究该蛋白负载DC细胞后，对DC的影响。目的构建人端粒酶逆转录酶与热休克蛋白70融合基因的原核表达载体，并在大肠杆菌BL21进行表达和纯化。初步研究融合蛋白对DC分化成熟的作用。方法利用PCR方法扩增hTERT基因片段(532aa～637aa)和HSP70全长cDNA，酶切后分别插入原核表达质粒pET-32a，形成pET-32a-hTERT和pET-32a-HSP70；然后双酶切后者，得到HSP70片段，将其插入前者hTERT的3’端，构建重组质粒pET-32a-hTERT-HSP70。经酶切鉴定和测序后，将pET-32a-HSP70和pET-32a-hTERT-HSP70转化大肠杆菌BL21，进行诱导表达和分离纯化。融合蛋白负载DC后，流式细胞仪检测细胞表面分子的表达。结果测序结果表明成功的构建了重组原核表达载体pET-32a-HSP70和pET32a-hTERT-HSP70。含有重组质粒的大肠杆菌BL21经诱导后分别表达约90kD和110kD的蛋白，经纯化后成功得到带组氨酸标签的可溶性目的蛋白。经HSP70、hTERT-HSP70融合蛋白诱导的DC细胞，表面分子CD80、CD86、HLA-DR表达上调，而CD14表达下调。结论人端粒酶逆转录酶与热休克蛋白70融合基因表达载体构建成功，并成功获得了纯化的融合蛋白HSP70和hTERT-HSP70，融合蛋白能诱导DC细胞分化成熟，为今后进一步的相关免疫实验研究奠定了基础。