温肾消癥汤介导IL-33治疗子宫内膜异位症纤维化的机制研究

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目的:建立子宫内膜异位症小鼠模型,比较在位内膜和异位病灶纤维化程度,探讨腹腔微环境对纤维化的影响;通过温肾消癥汤、IL-33干预模型小鼠,比较各组异位病灶纤维化程度,探讨温肾消癥汤通过IL-33对子宫内膜异位症纤维化的影响;通过观察温肾消癥汤干预下,EMs小鼠腹膜、大网膜、肠系膜中IL-33的表达变化,探讨温肾消癥汤下调IL-33的可能作用部位。方法:第一部分1、梳理前期研究基础。IL-33可促进子宫内膜异位症纤维化;温肾消癥汤可能通过下调子宫内膜异位症血清、腹腔液、异位病灶中IL-33表达,改善子宫内膜异位症纤维化。第二部分1、腹腔注射法建立子宫内膜异位症小鼠模型。2、将模型小鼠随机分成模型组、温肾消癥汤组、温肾消癥汤+rIL-33组,每组小鼠均灌胃,连续灌胃21天。(1)温肾消癥汤组:每日以11.678g/kg的剂量,给小鼠灌服0.2ml温肾消癥汤,每周2次腹腔注射0.1ml生理盐水。(2)温肾消癥汤+rIL-33组:每日以11.678g/kg的剂量,给小鼠灌服0.2ml温肾消癥汤,每周2次腹腔注射0.1ml rIL-33,剂量为0.05μg/g/d。(3)模型组:每日灌服0.2ml的无菌蒸馏水,每周2次腹腔注射0.1ml生理盐水。3、取模型组在位内膜、异位病灶,Masson染色检测胶原纤维,免疫组化法检测α-SMA、Collagen Ⅰ 的表达。4、取模型组、温肾消瘤汤组、温肾消癥汤+rIL-33组异位病灶,Masson染色检测胶原纤维,免疫组化法检测α-SMA、Collagen I的表达。5、取模型组、温肾消癥汤组的腹膜、大网膜、肠系膜,免疫组化法检测IL-33的表达。结果:1、模型组异位病灶胶原纤维面积比率、α-SMA、Collagen Ⅰ表达高于在位内膜(P<0.05)。2、与模型组异位病灶相比,温肾消癥汤组异位病灶胶原纤维面积比率、α-SMA、Collagen I表达下降(P<0.05),温肾消癥汤+rIL-33组异位病灶胶原纤维面积比率、α-SMA、Collagen Ⅰ 表达升高(P<0.05)。3、在子宫内膜异位症模型小鼠中,大网膜、肠系膜中IL-33表达均较高,腹膜IL-33表达较少(P<0.05)。与模型组相比,温肾消癥汤组中肠系膜IL-33表达下降(P<0.05),大网膜、肠系膜无明显差异(P>0.05)。结论:1、子宫内膜异位症异位病灶纤维化程度高于在位内膜,提示腹腔微环境可能促进了纤维化的形成。2、温肾消癥汤可能下调IL-33,抑制异位病灶纤维化形成,改善子宫内膜异位症纤维化程度,提示温肾消癥汤可能通过调控IL-33改善子宫内膜异位症的纤维化。3、温肾消癥汤可能下调肠系膜中的IL-33表达,改善子宫内膜异位症纤维化。
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