益气活血法对脑出血大鼠脑内VEGF、Flt-1及Flk-1mRNA表达的影响

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背景和目的:脑出血(Intrcerebral Hemorrhage,ICH)是一种临床常见的急性脑血管病,发病率高、死亡率高、致残率高,社会负担重。它属于祖国医学的“中风”范畴。自清代著名医家王清任提出气虚致瘀的观点,并创立益气活血名方补阳还五汤以来,益气活血法在脑出血中得到了广泛的临床应用并疗效肯定。现代基础研究发现,以补阳还五汤为代表的益气活血法能改善脑出血后病灶脑血流量及能量代谢、抑制炎症反应和改善血液流变学等。脑出血血肿区(血肿内部及周围)微血管系统已遭到破坏,因此必须通过血管新生重新建立血肿区微血管系统,改善血肿区微环境而恢复血肿区的血液灌注,为神经组织修复奠定基础。血管内皮生长因子(vascular endothelial growthfactor,VEGF)是迄今为止唯一被证明对血管新生有特异作用的生长因子,它通过与血管内皮细胞上的两个特异性受体VEGFR-1(fms-liketyrosine kinase-1,Flt-1)和VEGFR-2(fetal liver kinade-1,Flk-1)的结合,启动微血管新生,并最终形成成熟的血管结构而使损伤区微血管系统重建,促进血肿区的血液再灌注,加快血肿的吸收,恢复对病灶脑组织的供血供氧,促进神经功能的康复。本研究通过观察益气活血治法对实验性脑出血大鼠脑内VEGF、Flt-1和Flk-1 mRNA表达的影响作用,初步探讨益气活血法对脑出血大鼠脑内血肿区微血管系统重建的作用机制。方法:155只SD大鼠随机分成6组:正常对照组,假手术组,模型组,益气组,活血组,益气活血组。立体定位向脑内苍白球注入Ⅶ型胶原酶复制脑出血模型。益气组、活血组与益气活血组分别予补阳还五汤益气方、补阳还五汤活血方及补阳还五汤全方灌胃。分别于造模术后并灌胃1d、2d、4d、7d、14d、21d、28d七个时间点(其中正常对照组大鼠于1d)随机抽取5只大鼠做行为学观察,计算前肢不对称使用率;并于行为学观察后相应时间点(除2d外)深麻醉大鼠后迅速剥离颅骨,并分离鼠脑取得血肿区脑组织,运用逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测正常组及其它各组各时间点VEGF、Flt-1和Flk-1mRNA的表达。结果:1.前肢不对称使用率:大鼠脑出血后迅速出现偏瘫症状。模型组大鼠4天开始前肢不对称使用率明显下降,益气活血组大鼠7天开始低于模型组,提示益气活血法能降低脑出血大鼠前肢不对称使用率。2正常组及假手术组不同时间点VEGF、Flt-1和Flk-1mRNA均未见明显表达;模型组VEGF、Flt-1和Flk-1 mRNA在脑出血后1天即开始表达,4天时增高,21天达到高峰,然后逐渐减弱;益气活血组VEGF、Flt-1和Flk-1 mRNA表达在7-21天明显高于其他各组(P<0.05),VEGF和Flk-1 mRNA表达在术后14天达高峰(P<0.01),Flt-1mRNA在术后21天达高峰。结论:1.脑出血大鼠血肿区VEGF、Flt-1和Flk-1mRNA的表达增强。2.益气活血法能促进脑出血大鼠脑内VEGF、Flt-1和Flk-1 mRNA的表达而促进微血管新生,加快血肿的吸收,促进模型鼠神经功能恢复。
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