【摘 要】
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目的:本论文旨在以人工掺杂和生物富钒两种方法探索雪菊富钒的可行性,并考察其提取物对α-葡萄糖苷酶活性的影响及酶抑制作用类型。方法:（1）建立石墨炉原子吸收分光光度法测定样品中钒（V）含量;以4-硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷（p NPG）为底物,阿卡波糖为阳性对照药,构建体外α-葡萄糖苷酶活性抑制模型;根据酶促反应动力学原理,探索样品对α-葡萄糖苷酶活性抑制类型。（2）在单因素试验的基础上,以乙醇
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目的:本论文旨在以人工掺杂和生物富钒两种方法探索雪菊富钒的可行性,并考察其提取物对α-葡萄糖苷酶活性的影响及酶抑制作用类型。方法:（1）建立石墨炉原子吸收分光光度法测定样品中钒（V）含量;以4-硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷（p NPG）为底物,阿卡波糖为阳性对照药,构建体外α-葡萄糖苷酶活性抑制模型;根据酶促反应动力学原理,探索样品对α-葡萄糖苷酶活性抑制类型。（2）在单因素试验的基础上,以乙醇体积分数、超声时间、液料比为影响因素,总黄酮提取率和钒含量为评价指标,中心设计-响应面法优化钒黄酮配合物提取工艺。（3）以浓度50 mg/L的钒溶液喷施叶面的方法生物富钒,采集各时期空白对照雪菊及生物富钒雪菊叶片,以80%乙醇浸提法提取叶绿素,探究钒对雪菊生长过程中叶绿素a、叶绿素b,以及叶绿素总含量的影响;采集不同生长期雪菊的不同部位,测定植株不同部位钒的累积量;采用300道尔顿（Da）透析袋,考察样品中有机钒的含量;通过紫外和红外光谱扫描,判断雪菊总黄酮和生物富钒雪菊总黄酮光谱吸收的差异性。结果:（1）经测定,雪菊富钒能力较强。钒化合物浓度在25～800 mg/L范围内,雪菊富集钒总量在1.44～30.82 mg/kg之间。当钒溶液浓度为50 mg/L时,富钒率最高。人工掺钒雪菊提取物对α-葡萄糖苷酶的半数抑制浓度(IC50)为67.08±1.15μg/m L,且抑制率随浓度增加而增加。酶抑制动力学结果表明,提取物酶抑制类型为混合型。（2）在乙醇体积分数63%,超声时间为31 min,液料比26:1的最佳条件下,人工掺钒雪菊总黄酮提取率为（4.56±0.03）%,钒含量为（10.32±0.04）μg。（3）雪菊及生物富钒雪菊叶片中叶绿素a含量的变化趋势与叶绿素b相似,但各生长期叶绿素a含量均比叶绿素b高,且二者含量变化较为缓慢。叶绿素总含量变化趋势和叶绿素a、叶绿素b含量变化相似,叶绿素a/b值在不同生长期均有差异,其在幼苗期较低;生物富钒雪菊感光期叶绿素含量变化明显且含量增长较快,成熟期因钒的不断积累产生了负向影响,含量较雪菊低;外源施加的无机钒需通过叶面吸收再分布到植株其他部位,叶片中钒含量显著高于其他部分,可达到194.0μg/g;对比人工掺钒雪菊、雪菊和生物富钒雪菊总黄酮提取率,生物富钒雪菊的提取率（4.08±0.09）%明显小于人工掺钒雪菊及雪菊总黄酮提取率;通过紫外和红外光谱度对比分析,生物富钒雪菊总黄酮光谱吸收特征峰发生了变化;通过建立体外α-葡萄糖苷酶活性抑制模型,生物富钒雪菊总黄酮对α-葡萄糖苷酶具有较强的抑制作用IC50=56.85±0.77μg/m L,较雪菊、人工掺钒雪菊总黄酮酶抑制能力都高。结论:（1）成功建立了石墨炉原子吸收分光光度法测定钒（V）含量方法;在钒溶液浓度50 mg/L条件下,雪菊钒含量富集率最高;同时人工掺钒雪菊提取物具有较高的富钒率和较强的酶活性抑制能力。（2）中心设计-响应面优化钒黄酮配合物提取工艺可行,在最佳提取条件下,可从人工掺钒雪菊中获得较高的总黄酮和钒含量提取物。（3）钒溶液对雪菊生长发育有明显影响,其总黄酮具有较高的钒结合能力和α-葡萄糖苷酶活性抑制能力。
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