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蜱类是重要的媒介动物,传播多种人、畜疾病,造成极大危害。唾液腺在蜱类生命活动中起重要作用,而且又是各类疾病传播的窗口。因此,对其研究具有重要的理论和实际意义。 本文以广泛分布于我国的长角血蜱Haemaphysalis longicornis Neumann为研究对象,利用电镜技术、Bradford法、SDS—PAGE和Na~-、K~--ATPase活性微量检测法等现代生物学技术对其唾液腺结构、蛋白含量和成分、Na~-、K~-—ATPase活性及其动态变化,特别是保幼激素类似物法尼醇对唾液腺结构与分泌活性的影响进行了较系统地研究,为深入开展蜱类唾液腺研究提供依据。主要研究结果如下: 1.长角血蜱雌虫唾液腺由腺管和大量的腺泡组成。唾液腺管逐级分支,由中央腺管、主分支腺管和小叶分支腺管构成:依据腺泡分布位置的不同,可分为Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型腺泡,分别位于中央腺管、中央腺管与主分支腺管、小叶分支腺管上。首次发现长角血蜱腺泡表面呈非平滑状态,有大量的气管分布并逐渐分支深入到腺体内,为唾液腺生理活动提供氧气需求。 2.雌虫唾液腺随发育期而发生明显变化。饥饿雌虫唾液腺腺泡小(34.79μm),表面有人量的突起和凹陷;吸血后2d腺体和腺泡明显增大:交配期腺泡达到最大值(97.81μm),约为饥饿期的2.8倍,腺泡表面明显变得光滑;饱血后腺泡逐渐萎缩,发生自溶现象,饱血后4d唾液腺明显退化。 3.唾液腺蛋白水平在不同发育期发生明显变化,并与腺体结构变化趋势基本一致。饥饿期蛋白含量低(9.51μg/tick):吸血后2d蛋白含量急剧增加(34.90μg/tick);交配期达到峰值(84.40μg/tick),约为饥饿期的8.9倍;饱血后蛋白含量明显下降,饱血后2d和饱血后4d的含量分别为39.47μg/tick和20.54gg/tick。 4.饥饿雌虫唾液腺有17条蛋白带:吸血后2d增加到23条;交配后达到26条,直到饱血后4d保持不变,吸血和交配能刺激新蛋白的合成。唾液腺蛋白中主带有10条,分子量分别为192KD、158KD、136KD、133KD、129KD、97KD、84KD、74KD、45KD、 长角血蝉雌虫唾液腺结构与分泌活性的研究——中文摘要 32KD,主带在不同发育期发生增加、缺矢和量的变化。 5.采用加大样品量和酶微量测定技术首次检测到长角血.婢饥饿期和饱血后唾浓 腺中Na、K-ATPase活性,并完成酶活性的动态分析。饥饿期Na、K-ATPase活力低 (0.76Whol Pi/mg Pr,七r);吸血后 Zd活力急剧增大(1.06umol Pi/mg Pr/hr);饱 血当无达到最大值(1.4lwhol Pi/。g Pr/hr卜 饱血后唾液腺中Na、K-ATPase活力急 剧.降;饱血后4d又降到低水平(0.62An。IPi/mg Pr/hr)。这一结果属首次报道。 6 法尼醇对雌虫唾液腺蛋白含量、成分和腺泡有作用,并随发育期和剂量的不同。而产生不同效应。吸血后Zd用法尼醇处理,10陀剂量使唾液腺蛋白含量明显增加, 10ug、50ug和 100ug剂量抑制 136KD蛋白的基因表达。饱血当大用法尼醇处理,10ug;”50卜g和 100us剂量的法呢醇显着提高饱血后Zd唾液腺蛋白含量,100ug剂量使35Kll 蛋白表达,高剂量200卜g和 400卜g使 136KD和 192KD的蛋白缺矢。饱血当大处理,1卜g 和 10ng剂量均能显著提高饱血后4d雌虫唾液腺蛋白含量,高剂量100ug、200ty利 400ug抑制136KD蛋白的表达。上述结果表明法尼醇对唾液腺蛋白的合成有调控作用; 7.在吸血后Zd局部施用法尼醇,剂量* 和 104g对吸血-饱血当大Na、K-ATPase 活力无显著影响,但有使Na、K-ATPase活力增加的趋势。 上述研究结果显示,长角血婢唾液腺随发育的不同阶段,其结构、蛋白含量和咸 分以及Na、K-ATPase活性均发生一系列复杂的动态变化。保幼激素类似物法尼醇对 唾液腺蛋白含量、蛋白成分和腺泡有影响。