【摘 要】
：
酶的体外定向进化是蛋白质工程的新策略.研究人员利用易错PCR/DNA改组对L-天冬氨酸酶和α-天冬氨酰二肽酶进行改造,提高酶分子的活性和稳定性,分别得到酶活力提高28倍和47倍
论文部分内容阅读
酶的体外定向进化是蛋白质工程的新策略.研究人员利用易错PCR/DNA改组对L-天冬氨酸酶和α-天冬氨酰二肽酶进行改造,提高酶分子的活性和稳定性,分别得到酶活力提高28倍和47倍的进化酶.在合理化设计和非合理化设计相结合指导下,对天然条件下以四聚体形式存在的L-天冬氨酸酶进行结构域的重组,获得了稳定性提高的单体天冬酸酶.利用易错PCR/ShufflingPCR对大肠杆菌中合成海藻糖的酶系海藻糖-6-磷酸合成酶/海藻糖-6-磷酸水解酶进行协同进化,获得了海藻糖高产菌株.一、L-天冬氨酸酶定和进化研究;L-天冬氨酸酶是一种重要的工业用酶,可催化富马酸和氨生成L-天冬氨酸.二、α-天冬氨酰二肽酶的定向进化;α-天冬氨酰二肽酶(α-Aspartyldipeptidase),存在于鼠伤寒沙门氏菌(Salmonellatyphimurium)中,能够高度专一地水解N端为L-天冬氨酶的α羧基形成的二肽.三、大肠杆菌操纵子otsBA的定向进化研究;海藻糖是一种非还原性二糖,通常作为应激代谢物而广泛存在于生物体内.四、L-天冬氨酸酶结构域重组的研究;研究人员挑选了一个活性比较同的工程酶(Aspdr012)进行了研究.分子量检测结果表明该酶是一个单亚基酶,而天然的L-天冬氨酸酶是四聚体.虽然单体酶的酶活力低于天然酶,但其稳定性大大增强.同时为寡聚变为单体酶提供了一个模型.
其他文献
采用PCR诱导法和定点突变法,对PVY HC-Pro基因中心区域的CCCTmotif、PTKmotif进行定点改造,获得四种突变体,将其分别克隆到pBluescriptSK中,重组克隆分别命名为pSKRGAE、pSKD
该文首次对中国甜菜夜蛾的性信息通讯系统进行了系统的研究,旨在探明中国甜菜夜蛾性信息素通讯系统及其动态变化特点,并探索利用性信息防治甜菜夜蛾的新途径.主要结果如下:1)
近年来,高速铁路和城市轨道交通的快速发展,越来越多的非线性、大容量负载接入电力系统。谐波污染治理与无功补偿成为电力系统和电力用户亟需解决的问题。混合补偿系统作为一种谐波、无功和负序综合补偿装置,因其容量大、成本低、补偿效果好等优点受到广泛的关注。混合补偿系统的拓扑决定着设备的补偿特性和容量特性,而容量特性、补偿特性决定着装置的应用场所和装置的成本。故对混合补偿系统拓扑进行研究对混合补偿系统设计、选
用电信息采集与管理系统是被用来实现电能数据自动采集、计量异常和电能质量监测、用电分析和管理等功能的系统。近年来国内建设了众多类似系统,但受限于缺乏统一的技术标准
伴随着我国社会的不断发展与国民经济的持续增长,电气化铁路行业已经进入快速发展阶段。随着速度的不断提高、负荷不断增大,对可靠性与安全性的要求则更高。我国电气化铁路沿线附近一般架设三相10kV电力贯通架空线路或地缆线路,为铁路沿线的场站、信号、动力、照明等设施提供电力。当牵引供电系统带电运行时,在其周围会形成一个巨大的电磁系统,当对电力贯通线进行检修作业时,如果安全措施采用不当,感应电会对贯通线检修作
单周期控制具有控制简单、运算量小、响应速度快、控制精度高以及鲁棒性强的优点。在磁悬浮轴承全数字控制平台中,由于采样信号的非连续性,相比传统的控制算法,采用单周期数字控制算法具有更高的控制精度,因而有助于提升磁悬浮轴承的悬浮性能。本文对单周期数字控制在磁悬浮轴承开关功放中的应用进行了深入研究。在考虑电阻压降的情况下,优化了四种适用于磁悬浮轴承开关功放的单周期数字控制算法——单极性单周期控制电流均值跟
尼可霉素是几丁质合成酶的强竞争性抑制剂,对真菌、昆虫和螨虫都有抑制作用,而对动物、植物无毒害作用且在自然界中易被降解,是一种较为理想的农用抗生素.
全文共分两部分.第一部分:从银杏来源的一个几丁质结合蛋白的研究.经过80﹪硫酸铵沉淀、几丁质亲和层析和凝胶过滤层析三个步骤,我们从银杏(GinkgoBiloba)的叶片中纯化获得了一
草甘膦是一种广谱、内吸、高效的灭生性除草剂，可以通过植物的韧皮部进行运输。它通过与EPSPS酶分子结合，阻断芳香族氨基酸的合成，从而引起细胞死亡。它具有易降解，对人畜无毒等特点。我国从八十年代开始生产草甘膦，目前已具有相当规模。质量已达到国际水平，是我国产量最大的除草剂品种。也是我国主要的农药出口品种。由于草甘膦是一种灭生性除草剂，在杀死杂草的同时也会不加选择的杀死作物...