【摘 要】
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目的：通过传代培养并结合Transwell侵袭小室筛选出不同侵袭能力的食管癌细胞亚株；通过体外检测分析原代及亚株细胞生物学特性；蛋白质组学研究二种食管癌细胞株的差异蛋白,发现并
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目的：通过传代培养并结合Transwell侵袭小室筛选出不同侵袭能力的食管癌细胞亚株；通过体外检测分析原代及亚株细胞生物学特性；蛋白质组学研究二种食管癌细胞株的差异蛋白,发现并研究热休克蛋白90(HSP90)在不同侵袭能力的食管癌细胞原代及亚株的不同表达并研究其在临床上的作用。方法：人食管癌Eca-109细胞株通过Transwell侵袭小室筛选出高侵袭力的细胞亚株Eca-109T4,HE染色比较二种细胞株形态,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力的改变,划痕实验检测细胞的迁移能力,并运用采用180/160分别标记2种细胞样本酶切后的多肽混合物。纳升级反相液相色谱串联质谱技术(Nano-RPLC-MS/MS)分析鉴别二种细胞株的差异蛋白。实时荧光定量PCR (real time PCR)验证差异蛋白HSP90在二种不同细胞株中的表达。结果：通过Transwell侵袭小室筛选出高侵袭力的细胞亚株并命名为Eca-109T4。HE染色示两个原代及亚株形态没有明显差异,MTT法检测显示亚株Eca-109T4增殖能力较原代强,划痕实验示亚株Eca-109T4移动能力明显增强。Nano-RPLC-MS/MS鉴定出7种差异蛋白,其中有3种蛋白可能与食管癌的恶性生物学行为相关,它们是HSP90、RKIP、Annexin A1。实时荧光定量PCR示HSP90在Eca-109T4升高(P<0.05)。结论：通过Transwel1侵袭小室得到了高转移的Eca-109T4,差异蛋白我们分析HSP90,其在高转移的的Eca-109T4上调,可能与食管癌的高转移有关。
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