【摘 要】
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喉癌干细胞的研究目前只处在起始阶段,但这一概念为癌症的临床治疗提供了全新的视角,给人类战胜肿瘤带来了希望,对未来肿瘤研究的影响是不可估量的。本文以喉癌细胞系Hep-2为
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喉癌干细胞的研究目前只处在起始阶段,但这一概念为癌症的临床治疗提供了全新的视角,给人类战胜肿瘤带来了希望,对未来肿瘤研究的影响是不可估量的。本文以喉癌细胞系Hep-2为研究对象,采用荧光染料Hoechst33342对细胞染色后,应用流式分选技术检测分离SP和NSP亚群,应用RT-PCR、细胞免疫荧光、Western blot方法检测ABCG2分子在SP和NSP细胞中的表达,发现喉癌细胞系Hep-2中存在SP亚群,而且SP的表型与ABCG2密切相关。进一步通过观察分离后的SP和NSP细胞的生长形态、细胞周期分布、增殖能力、迁移能力、侵袭能力、粘附能力、克隆形成能力、对化疗药5-FU的耐药性等体外生物学特性及在免疫缺陷小鼠体内移植瘤成瘤能力来证实喉癌细胞系Hep-2的SP细胞是相对静止的,具有很强的增殖、分化、克隆形成、迁移、侵袭、成瘤及化疗耐药能力的干细胞样的细胞亚群。最后按照前期实验方法对40例临床喉癌标本原代培养细胞进行Hoechst33342染色后,通过流式细胞仪检测临床喉癌标本原代培养细胞中是否存在SP细胞,并探讨SP细胞与喉癌临床病理学因素的关系。经过研究发现检测的大部分喉癌标本中确实存在SP细胞亚群,SP细胞的比例与喉癌临床分期、病理分级相关。本实验进一步验证了肿瘤干细胞学说,探索了一种有意义的喉癌干细胞的分离方法,并初步确认了SP细胞与喉癌预后的关系,为今后喉癌干细胞的深层次研究奠定了初步的理论和实验基础。
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