(S)4-氯-3-羟基丁酸乙酯((S)-CHBE)是他汀类药物一羟甲基戊二酰CoA(HMG-CoA)还原酶抑制剂的关键手性中间体,也可经由氯基的置换、还原等反应,导入其他基团生成所需的手性药物中间体。利用生物催化羰基不对称还原4-氯乙酰乙酸乙酯合成(S)4-氯-3-羟基丁酸乙酯具有反应条件温和、成本低、产量高、产物光学纯度高等优点,已成为制备(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯的重要方法。本文首先建立了底物4-氯乙酰乙酸乙酯和产物(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯的气相分析方法,并成功实现了两种异构体在手性色谱柱上的基线分离。从200余份土样和实验室现有菌株中筛选到一株能够高效催化4-氯乙酰乙酸乙酯合成(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯的菌株ZJB-12164,产物光学纯度(ee.)达99%以上。通过形态学观察、生理生化试验、18S rDNA测序,确定该菌株为Candida sorboxylosa。通过单因素实验优化了C sorboxylosa ZJB-12164产羰基还原酶的培养基成分和最适发酵产酶条件,确定了最适培养基组成为(g/L):葡萄糖 10.0,酵母提取粉 50.0,KH2P04 2.5,CuC12 0.02,NaCI1.0。最适发酵产酶条件为:装液量30mL/500 mL,接种量1%(V/V),初始pH5.0。在上述培养条件下,30℃、150r/min培养20h后,菌体干重达11.2 g/L,羰基还原酶酶活达202.4U/L。进一步考察了C.sorboxylosa ZJB-12164全细胞催化不对称还原过程中缓冲液pH、温度、辅助底物、底物浓度等参数的影响,确定了最适反应条件:温度35℃,pH 8.0磷酸盐缓冲液,辅助底物40 g/L葡萄糖。当湿菌体的浓度为50 g/L时,最适底物浓度为60 mM。通过向反应体系中分批添加底物,可显著消除底物抑制。反应过程中控制pH恒定的基础上,8h后产物积累达到了 207.9 mM,产率达86.6%。以上结果表明,Csorbxylosa ZJB-12164在生物合成(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯中具有一定的应用潜力,为建立廉价、高效、具有自主知识产权(S)4-氯-3-羟基丁酸乙酯合成工艺奠定基础。